发布时间：2023-06-26 16:14:48
序言：写作是分享个人见解和探索未知领域的桥梁，我们为您精选了8篇的法医学研究样本，期待这些样本能够为您提供丰富的参考和启发，请尽情阅读。
关键词：Y染色体；单核苷酸多态性；复合PCR扩增检测体系；法医学应用
Y染色体具有男性伴性遗传特性，呈单倍型向下遗传，在减数分裂中不发生重组，一般由父亲直接传给儿子。在个人识别方面，由于Y染色体SNPs非随机分布于人群中，其种群的地域性特异明显，所以可以用于案件中生物学所属群体的推断。尤其在案、案中分析男女DNA混合物时，Y染色体遗传标记扩增分型技术对单倍型检测结果的获得不受女性成分影响，具有其他遗传标记所没有的明显优势。因此，23-plex Y-SNPs遗传标记复合扩增检测体系在法医学上具有潜在的特殊价值。
1 材料与方法
1.1主要实验仪器 ①PCR扩增仪：480型、9600型、9700型（Applied Biosystem，美国）；②定量PCR仪：ABI PRISM7500（Applied Biosystem，美国）；③电脉仪：Bio-RAD公司（美国）；④DNA全自动遗传分析仪：Prism 310、Prism 3130-XL（Applied Biosystem，美国）；⑤高速台式离心机：ZKl5、ZK3（Sigma，美国）；⑥超纯水仪：Millipore（法国）。
1.2主要实验试剂 ①SNaPshot试剂盒（Applied Biosystem，美国）；②ExoSAP-IT（USB公司，美国）；③虾碱性磷酸酶SAP（Amersham公司，美国）；④dNTPs混合物（Fermentas，MBI公司，立陶宛）；⑤Amp FL STR Profiler YfilerTM试剂盒（Applied Biosystem，美国）；⑥Quantifiler human DNA quantification试剂盒（Applied Biosystem，美国）。
1.3实验样本及其DNA的提取和定量 在公安部物证鉴定中心随机抽取290名广东地区汉族无亲缘关系的男性个体，使用采血卡或中性滤纸收集他们的指尖血，编号1-290，采用DNAIQTM（Promega公司，美国）试剂盒进行DNA提取，并且采用Quantifiler TM试剂盒（Applied Biosystem，美国）在ABI PRISM7500定量PCR仪上进行定量，4℃妥善保存，以备Y-SNPs扩增体系的建立和PCR反应条件的优化。
1.4 Y-SNPs遗传标记复合扩增体系的建立
1.4.1 Y-SNPs位点的选择 根据Y染色体命名协会的在线补充材料，参考Y-SNPs信息的在线网站和dbSNP数据库信息，在亚洲人群中筛选出多态性较高的单体群以及对应的23个Y-SNPs位点：P164、P203、P148、P145、M89、P151、M216、P128、P157、P149、P131、P199、P123、P191、P201、M1ll、M9、P132、P200、P197、M119、P136和M134。其中，Ml1l是2 bp缺失，M134是l bp缺失突变，M199是1 bp插入，剩下20个位点均为碱基的转换或颠换。
1.4.2 Y-SNPs位点PCR引物设计与验证 以NCBI dbSNP数据库和Genbank中的Y染色体序列筛选的位点及其邻近序列为模板，参照引物设计的一般原则，使用Primer Premier 5.0软件自行设计并使用Oligo 6.0软件进行分析优化。引物合成后，采用基于局部比对搜索工具（BLAST）快速地对比分析它的高特异性。
1.4.3单个Y-SNPs位点PCR扩增体系的建立 单位点PCR扩增体系的建立。1个男性DNA样本定量后，分别对23个Y-SNPs位点引物进行单独扩增，建立每个SNP位点均适用的PCR扩增体系。PCR反应体系为25μL，PCR反应条件为：95℃11min，95℃30s、55℃30s、72℃30s，循环35次，最后延伸为72℃10min。
1.4.4 23个Y-SNPs位点复合PCR扩增体系的建立 通过正交实验的方法，调整PCR反应参数、PCR反应体系中各离子的浓度以及各引物对的浓度，建立23-plex Y-SNPs复合PCR扩增体系。PCR反应体系为25μL，包括：0.4～1ng DNA模板、2.5 U AmpliTaqGold DNA聚合酶、1×PCR buffer、PCR引物浓度在0.006 8～0.0676μmol/L、每种dNTP各600μmol/L、8 mmol/L MgCl2。PCR反应条件为：95℃11min，95℃30s、55℃40s、65℃45 s，循环35次，最后延伸为65℃10min[1]。
1.4.5 PCR反应产物的检测与纯化 首先取15μL 10×上样缓冲液与2μL PCR产物混匀后上样至6%非变性聚丙烯酰胺凝胶（C=6%，T=3.3%），450 V电泳2～3h，银染显色。然后，使用8μL或7μL酶纯化体系进行PCR产物纯化。
1.4.6单碱基延伸反应体系的建立及其产物的纯化 采用SNaPshot试剂盒（Applied Biosystem，美国）推荐的反应体系：纯化后的PCR产物、微测序引物混合物以及去离子水分别2μL，SNaPshot mix 4μL。循环参数为：96℃10 s，50℃5 s，60℃30 s，循环25次。单碱基延伸反应结束后，向反应产物加入1μL SAP（1 U/μL），37℃孵育1h，80℃15 min进行纯化处理，并去除多余的引物和ddNTPs。
1.4.7荧光标记和毛细管电泳检测 ①4种不同荧光物质标记ddNTPs，故ddNTP所发射的荧光量亦有差异，蓝色（FAM）、绿色（HEX）、黄色（TAMRA）、红色（ROX）荧光物质发射的荧光比约为4：2：1：1，判读结果时必须对不同荧光标记的RFU值进行标准化[2]；②采用3130-XL遗传分析仪对纯化后的单碱基延伸反应产物进行电泳检测。取1μL纯化产物加入10μL Hi-Di甲酰胺中，再加入0.3μL GeneScanTM Size Standards LIZ-120作为内标。进样时间10s，电压15kV，POP-4凝胶，36cm毛细管，电泳30min。毛细管电泳结束后，使用Genemapper ID V3.2软件对结果进行分析。
2 结果
2.1检测结果 23-plex Y-SNPs电泳检测显示：23个位点均为单倍型，各个位点PCR扩增均衡，多次重复试验结果一致。基因多样性与单倍型多样性的计算公式为：h=n（1-∑X2i）/（n-1）。经法医学参数计算，23个Y-SNPs位点均具有遗传多态性，每个位点基因的多样性范围为0.0137～0.4912。检测的290名男性个体中有11种单体群、143种单倍型，其单倍型多样性为0.9907。
2.2法医学应用 ①灵敏度：倍比稀释浓度为200ng/μL的参照DNA，分别进行复合PCR反应和复合单碱基延伸反应，25μL复合体系中DNA含量为0.1～50ng时均可得到较好的分型结果；②种属特异性：利用磁珠法提取雄性猴、狗、猪、鸡、黄牛、山羊、家兔、大白鼠等动物的DNA.建立复合PCR扩增体系，结果显示动物标本中均未检测到任何Y-SNPs位点；③组织同一性：任何男性个体自身的骨骼、肋软骨、肌肉组织、皮肤、肝脏、血痕、指甲等进行23-plex Y-SNPs复合检测，分型一致。
3 讨论
本研究建立的23-plex Y-SNPs复合检测体系具有良好的男性特异性和种属特异性，检测灵敏度高、重复性好。23-plex Y-SNPs复合检测体系在法医学上的应用是可行的，尤其是对父系家族的亲权鉴定、无名男尸的个人识别、混合斑男性成分的检验等具有积极意义[3～6]。常规DNA指纹、ABO血型、酶型、RFLP、STR等传统的法医学物证检验在法医学实践中均存在一定的局限性。在刑事案件中，尤其是涉及追溯父子关系和性犯罪的案件，譬如：内裤上精斑等犯罪案件的检验样本，采用直接检测Y-SNPs的方法可有效避免传统检测的繁琐步骤，从而快速获得准确的检测效果。在23-plex Y-SNPs系统的基础上，联合使用STR系统和常染色体SNP检测系统，其结果清晰、灵敏度高、重复性好、稳定性强，在法医学领域有广阔的应用前景。
参考文献：
[1]邓志辉，李茜，吴爽，等.17个Y-STR基因座在亲子鉴定中的应用研究[J].中国实验血液学杂志，2008，16（3）：699-703.
[2]新尧，杨庆恩，刘超，等.法医物证学实验指导[M].北京：人民卫生出版社，2008：68-76.
[3]张爱平，刘超，刘长晖.Y染色体SNPs及其在法医学中的应用[J].刑事技术，2009，5：32-34.
[4]邓志辉，李茜，吴爽，等.17个Y-STR基因座在亲子鉴定中的应用研究[J].中国实验血液学杂志，2008.16（3）：699-703.
（一）严格的司法鉴定机构准入制度在德国，司法鉴定管理部门对鉴定机构的准入管理非常严格，德国的认证体系建设方面有将近一百年的经验，德国国家认证中心（DAKKS)承担德国认证认可的所有工作，涉及检测实验室、校准实验室、检查机构、产品认证机构、人员认证机构、质量体系认证机构、环境管理体系认证等领域，该公司不以盈利为目的。德国的第三方认证体系成熟，条件优越，经验丰富，这无疑给司法鉴定机构的准入认证提供了有力的技术保障。
（二）鉴定机构独立，分工明确欧洲被国际上认为是法医学发展最迅速、体制最为完善的地区之一，其中首屈一指的是德国，德国的法医鉴定工作是由各医学院校的法医学研究所承担，法院、检察院和警察局均不设法医。法医学研究所、法院、检察院和警察局均为独立的机构，分工明确，互不冲突，医学院校的法医学研究所不承担刑事诉讼的职责，其鉴定结果受外界干扰的因素少，这样有利于保证法医鉴定工作结果的真实性和可靠性。
（三）以学术科研为依托的鉴定机构在德国，各大法医研究所的教授和资深专家均有自己的科研工作，并与警察局有专业协作和科研合作关系，其科研成果对具体的法医鉴定工作起到辅助作用。在荷兰，鉴定师除了日常的工作外，还需要进行技术研究项目，保证鉴定技术开发方面处于领先地位。
（四）严格的质量控制体系在美国，法医鉴定体系具有严格的质量控制体系，其质量控制包含能力验证、实验室审计、技术审查和纠正措施程序。通过能力验证可以评估技术人员所运用鉴定方法是否恰当、结果是否正确、对材料的污染以及实验室的真实情况。实验室审计由内部同行审计到由ASCLD/LAB（美国社会犯罪实验室/实验室认可委员会）的认证检查员组成专业小组执行全面的审计工作。纠正措施程序是要求一旦能力验证发生偏差或者实验室出现错误的情况立刻察觉并要及时改正。美国的法医鉴定质量控制体系在全世界范围内处于领先地位，严格的质量控制保证了鉴定结果的客观公正。
二、我国法医鉴定体制
从国外的法医鉴定体制的特点来看，其发展状态已经呈成熟趋势，只有健全的法医鉴定体制，才能够体现法医的司法公正，与国外法医鉴定体制相比，我国的法医鉴定体制发展延迟，现将我国法医鉴定体制的缺陷总结如下：
（一）司法鉴定机构准入制度松弛在我国，社会上存在大量的社会中介机构，同时，很多司法鉴定机构也是为了应对政策而仓促设立的，许多条件相对不足的机构趁机混入司法鉴定队伍，导致鉴定机构过多过滥。由于鉴定部门数量众多,各鉴定机构的硬件和软件条件层次不齐，当事人根据有利于自己的鉴定结论为依据选择鉴定机构，导致了社会上重复鉴定、多头鉴定的现象层出不穷，严重影响了司法鉴定的公正和公平性。
（二）法医司法鉴定管理体制不完善由于国家没有法律明确法医鉴定工作的主管领导部门，造成长期以来鉴定机构缺少宏观调控的政府管理机构，从而引发了一系列的问题，例如各鉴定机构的技术水平不均衡、鉴定机构及鉴定人资格准入的权限随意性大、缺少统一的法医学司法鉴定技术标准、没有严格有效的质量控制体系、领导班子职责不清等，导致了司法鉴定体系的工作人员工作状态大都各行其事、混乱无序。最终严重阻碍了我国司法鉴定工作的有序进行，更无从谈起发展和进步。
（三）缺乏法医司法鉴定标准在不完善的管理体制下必然导致缺乏统一的法医学司法鉴定标准，国家没有统一的鉴定标准，各系统按照自己情况制定标准，鉴定标准五花八门，互不影响约束。证据采信存在任意性，缺乏公允性。在鉴定结论的认定上，无法律规定的标准，法官自由裁量权太大，裁判的公正受到质疑。
（四）法医职责制度不明朗在国内，多数法医学专业人才出自医科大学法医学系，但是目前的情况是由于社会就业压力，许多法医学专业的人才毕业后很难进入司法机关从事法医学专业技术工作。法医鉴定机构的工作人员大多为兼职，他们在干好自己的本职工作的前提下还要从事法医鉴定机构的鉴定工作，在巨大的工作压力下，最终会直接影响到法医司法鉴定的准确性和科学性。此外，由于法医工作者是属于高体力、高脑力和高风险职业，相比于法官、检察官等职业，收入较低，待遇较差，导致法医工作者工作积极性差，从而间接影响其工作质量。
三、讨论
但问题是“艺术学理论”首先要面对的是艺术作品，不是直接的理论。那么，当他们或我们面对艺术作品如何研究它们，如何诠释它们，并进而上到艺术理论的高度，这就涉及一个对艺术的认识和理论研究的方法问题了。
一、综合艺术实践经验
如何理解“艺术学理论”我们无法绕过它建立的初衷。张道一先生从南京艺术学院调到东南大学的目的，就是要建立‘‘艺术学”这门学科。他认为‘‘我国的艺术研究一直停留在分类地进行，缺乏整体的宏构。”mP4)无论是从学科，还是现实艺术研究的状况，都缺乏一个统摄艺术的理论体系和专门探讨、研究这门学问的学科。基于这个现状和认识，张道一先生提出了“应该建立艺术学”的构想策略。诚如张道一先生指出：
“对于艺术的宏观考察，整体研究，综合地探讨它的共性和规律，作为人文科学的一部分进行配列设施，在艺术教学中则一直阙如。在这种情况下，高等院校的专业目录和国家学科目录，就成了一个缺门。譬如说，在学科目录中‘艺术学’属于‘文学类'但只是作为‘一级学科’的总名，用来概括音乐、美术、戏剧、电影、舞蹈等‘二级学科’（专业），而缺少实在的‘二级学科’的‘艺术学'这样，对艺术进行宏观的、综合的、整体的研究，就无法定位。
这里张道一先生已经把构建“艺术学”的目的讲得非常明确了，并率先于1996年在东南大学开始招收全国首届‘‘艺术学”博士生。这就是“艺术学”建立的目的和意义，是构建‘‘艺术学”的初衷。
2011年升级为大门类的艺术学，把原来的二级学科‘‘艺术学”更名为今天大家称谓的“艺术学理论”，避免了与大学科门类‘‘艺术学”名称重复，并升为一级学科。名称的变化并没有改变它的性质。原来的二级学科“艺术学”，与今日的“艺术学理论”本质上完全一致，科学目的、任务没有任何改变。
但是自从艺术学理论成为‘‘大蛋糕”以后，全国各高校纷纷申报艺术学理论硕士点和博士点。就目前高校申报成功的博士点情况来看，艺术学理论的博士点申报成功数为18个点，居艺术学下的一级学博士点最多。为何一下增加了这么多的艺术学理论博士点，这是非常怪异的事情。我们简单分析一下就明白其中的“奥秘”了：其他一级学科都有艺术创作实践学科支撑，也有本学科的史论支撑。艺术实践需要很多的优秀艺术作品，如国家级别的奖、大展、演出等艺术作品，来支撑申报硕、博学科点。这些艺术作品一时半会是弄不出来的。譬如五年一度的全国美展，谁也没有本事马上得一个金奖，就是早期_年_度后又改为一年二度的“梅花奖”，也不是谁想评就评得上的。这需要‘‘台上一分钟台下十年功”的磨砺。这些有艺术实践要求的科学，艺术作品支撑学位点的申报很重要，没有艺术作品的支撑，学科点是拿不下来的。当然本学科的艺术史论也是很重要的理论部分。那么，唯独不需要艺术作品而全凭艺术理论支撑申报的“艺术学理论”硕、博点，就有很大的问题了。即申报的成果材料是否属于艺术学范围内的理论研究成果，非常值得质疑。因为一些申报硕、博点的成果，多是文艺学和美学的研究成果。有的高校甚至就是以文学院的名义申报“艺术学理论”的博士点，居然也成功了。这种乱象就给“艺术学理论”的学科方向和研究带来了前所未有的麻烦和混乱。
从学理上讲，文学属于艺术的范畴。但是从当前的学科上讲，文学与艺术学各属于两大门类科学。而且从学科内部范畴的确认中，艺术学下属的是美术、音乐、舞蹈、戏曲、戏剧、电影、电视、曲艺等等视听感觉系统的艺术种类，并不把文学包含在其中。艺术学理论也是对这些“艺术种类”进行综合、宏观、整体的理论研究，讨论艺术规律和原理性的问题。张道一先生把艺术的理论分为三个层次：第一层次是艺术的技法理论；第二层次是艺术的创作理论；第三层次是艺术的原理性理论。
最后一个层次当属我们今天说的“艺术学理论”了，但前面两个理论层次才是它的基础。没有艺术技法理论和艺术创作理论为基础理论，艺术的原理性理论就无法进行展开和研究。艺术技法和艺术创作直接与艺术作品关联，艺术学理论的研究首先也要面对它的研究对象。艺术学理论不能简单地从理论到理论，它需要自己的研究对象——艺术作品作为底层基础。脱离艺术作品的理论，只能是空洞的乌托邦似的理论，也不可能把问题讨论清楚，把理论说透。因此，从事艺术学理论的研究，应该首先是熟悉各艺术种类的艺术，知道它们是如何被创造出来的，艺术家运用的什么技法，艺术家如何运用的技法，作品的结构如何，布局如何，怎样呈现主题或母题。如果再具体一点，绘画艺术的笔墨生成、技法与艺术原理是一种什么关系，如何去理解中国画论中所探讨的笔墨问题，什么是皴法，为什么说皴法的出现是中国山水画成熟的重大标志。
怎样解读范宽《奚山行旅图》中的皴法与线条的关系问题，怎样理解皴法与树木山石的结构关系问题，李成、郭熙又是如何推进山水画的进程，他们使用的蟹爪树枝造型和卷云山石造型，对中国山水画造成的是什么影响，又怎样分析《清明上河图》中出现的蟹爪树枝的形态与李郭之间存在的关系。再譬如西方绘画。威尼斯画派、荷兰画派对“光”是如何理解和表现的，他们与印象画对“光”的理解和表现的差异是什么，印象派的环境色是依赖什么关系构成的，环境色在画面中是怎样呈现的，如何看待印象画派的写实性质，他们与文艺复兴时期的写实是何种关系的写实，与写实主义又是一种什么关系，这些不从技法和创作上探讨是说不清楚的。《蒙娜丽莎》画面的焦点在什么位置，为何要出现这个焦点，面部的明暗关系和人物结构形成的是何种对位的关系，如此等等。没有这样的艺术技法理论和艺术创作理论为基础，又如何做艺术学理论的研究昵，又怎么上升到理论高度昵。这里我们还仅仅是以绘画为例——而且是顺便提出几个问题。艺术学理论是要把所有艺术种类全部打通，来探讨艺术的原理性问题和艺术的规律等问题的，而所研究出来的成果，又能揭示所有不同种类艺术共性的本质特征，而不是某一艺术种类的本质特征（否则就是门类理论），还能解释艺术总体规律，又是具有宏观的、综合的和整体的高度的艺术理论。试想，当下这种混乱的现象，如何做艺术学理论研究和学科建设。
我们这里提出一个行之有效的简单方法，就是从事艺术学理论的研究者，首先要真的懂得艺术，了解艺术。要做到这一点，就要求艺术学理论的研究者，具有一定的艺术创作实践经验。学习一些美术、音乐、舞蹈的基础知识。很多的人在探讨中国山水画时，常爱用“散点透视”来理解中国的所谓‘‘透视”问题，而且还有一些研究者，非得把郭熙、郭思父子提出的“三远”当成西方的透视对待。这些都是常识性的错误。为什么我们这里把美术、音乐和舞蹈作为艺术学理论研究者需要具备艺术实践的对象，主要在于这样几个方面：美术是视觉的、空间的艺术，音乐是听觉的、时间艺术。就是说从美术和音乐各自包含了艺术存在方式和感受方式两个方面，人类感受艺术的两大主管精神层面的高级器官——视觉和听觉，被美术和音乐全嚢括尽了。舞蹈的载体非常特殊，它是我们人类自身，情感直接宣泄的载体一“情动于中而形于言。
言之不足，故嗟叹之。嗟叹之不足，故咏歌之。咏歌之不足，不如手之舞之足之蹈之也。(《诗?大序》）从这个层面讲，舞蹈与人类关系最直接。其他的艺术形态诸如戏曲、影视、设计、曲艺等等，都有我们说的美术、音乐和舞蹈的基本要素。除了设计外，但设计与美术相关，其他均是“时空艺术’“视听艺术”或“综合艺术”。如果能够打通美术、音乐、舞蹈这三门艺术种类，基本上就有艺术学理论的视野了。我们把艺术学理论要求打通的核心三门种类美术、音乐和舞蹈，称为“三原色”打通论。我们这里形容的‘‘三原色”来自绘画色彩理论。从色彩的关系上讲，拥有了红黄蓝三原色，就可以调出任何颜色来。从事艺术学理论的研究者，如果拥有美术、音乐和舞蹈这“三原色”，就有综合的学术能力，有宏观的学术视野和整体的驾驭能力。但是，一个从未学过绘画的人，没有艺术实践经验，他哪里会知道这里“形容”的含义。因为他根本不知道何种颜色调在一起，变成的又是一种什么颜色来。如果是一位学过绘画的人，这个形容对他来讲，艺术学理论的困惑问题就迎刃而解了，知道为什么要打通各种门类艺术关系的含义，知道艺术学理论是做什么的了。很多“看热闹”的群体，最多知道一些类似这样的概念，仅仅是文字表层的概念而已，是知其然不知其所以然。所以，我们倡导从事艺术学理论的研究者，需要掌握美术、音乐和舞蹈的一些基本技法，亲自参与一点艺术实践创作活动，并将这些实践经验综合之，作为自己从事艺术学理论研究的基础知识。
二、形下至形上归纳普遍性
基于以上的艺术实践经验角度，艺术学理论的研究方法需要“形下至形上”，然后归纳艺术的普遍性和原理性。张道一先生指出：“艺术学则是研究艺术实践、艺术现象和艺术规律的专门学问，它是带有理论性和学术性的，成为系统知识的人文学科。不懂得艺术实践或没有艺术实践的经验，如何去研究艺术实践，如何研究艺术现象，当然也就无法研究艺术规律了。对艺术规律的探究，首先是来自于对艺术本身诸问题研究所得出的结果。艺术理论研究如果不是针对艺术作品去研究问题，而是从一个概念到另一个概念，一种理论到另一种理论是没有意义的。张道一先生曾借用陈之佛教诲说‘犒史论不要离开实践，一旦与实践脱离，许多问题不但看不出，也吃不透。的确如此，没有艺术实践的人，做出来的东西，多是在被抽空的概念中绕圈子，抓不住艺术的本质性问题。
中国文化思想一直强调的是‘‘道”与“器”的关系问题“道”与“器”的关系正好说明了“艺”与“术”的关系问题。“道”与“艺”对应“器”与‘‘术”对应。中国的“艺术”这个概念就是“道器”概念的物质化具体的呈现。没有形而下的‘‘器”，就不可能产生形而上的“道”。艺术同样如此，没有形而下的‘‘术”，就没有形而上的‘‘艺”。由“器”进‘‘道”是中国文化的基本逻辑。这里正好给我们提供了艺术学理论的研究方法，就是以艺术作品为研究对象和起点，再上升到艺术的理论高度，即由形而下至形而上的研究方法。脱离艺术作品这个研究对象的理论研究，终究是伪艺术学理论。
这种伪理论的确有。有人提出艺术学理论二级学设立“应用艺术学理论”，这就是本身脱离了艺术作品和艺术实践的人，才会提出这种奇怪的“理论”来。艺术理论不是抽象理论，不是从概念到概念。它本身就是具体的并且对艺术创作具有指导性的意义。这就是艺术学理论的‘‘用”。怎么会再‘‘整”—个古怪的‘‘应用艺术学理论”来。提出这样“理论”的研究者，估计是哲学或美学学术背景出身。因为在美学中提出了“实践美学”，便借用这个概念略微改动，用到了艺术学的学科里来了。我们都知道，哲学和美学在西方来讲本是一家。都是以逻辑的方法，用概念推演概念，概念实证概念的学科。黑格尔就是用他的绝对理念来证明他的美的概念，最终实证出‘‘美是理念的感性显现”的结论。所以，黑格尔的绝对理念、绝对精神和他的美是一致的，美也是抽象的概念。即使黑格尔在他的《美学》着作中谈到了艺术，也是作为论证“美”的概念的，而不是以艺术为研究对象探讨具体的美的本质问题。因此，西方美学中的‘‘美”是抽象的‘‘美”。
实质是把“美”作为一个哲学的概念，探讨的依然是哲学问题。哲学的思维方式就是逻辑推论，从概念到概念的推论，不是去解决实际问题的，是解决思维本身的问题。故此，随着西方美学发展，美学家们认识到‘‘美”要解决实际问题，要用到社会生活实践中去，提出了‘‘实践美学”，近年来也有直接提出“实用美学”的。艺术学则与美学不同，艺术学的建立就是要解决艺术的问题，西方同样如此。所以，一旦美学解决不了艺术的问题，德国的德索（1867-1947)和乌提兹（1883-1965)等西方美学家，将艺术学从美学中分离出来。中国艺术学的建立没有遭遇西方这种“分离”情况，一开始就是针对艺术进行研究的，要解决艺术的问题。中国古代画论、书论、乐论、舞论、曲论，甚至诗论、文论，都是直接以作品为研究对象，并直接解决艺术（也包括文学）的问题。也就是说，中国的艺术学研究是从形而下开始的，然后才提出了形而上的艺术理论来解决艺术问题。诸如气韵论、意象论、意境论、写神论、逸品论、一画论，立象尽意，得意忘象，中得心源，澄怀味象，以形媚道，神与物游，大象无形……这些形而上的艺术理论，就是解决中国艺术问题的艺术理论。再提一个‘‘实用艺术学理论”，不但缺乏起码常识，逻辑也不通。这就是跟着西方文化逻辑跑的结果。最近看到钱乘旦的《中国学术不能再唯“外”是从了》，我们很赞同他的观点：
现在，中国人头脑里装满了“进步”“发展’“先进’“落后”“规律’“必然性”这一类西方文化特有的概念，为了不‘‘落后”，因袭照搬西方话语，也就成了中国学术“进步”的一个标志。20世纪以来，中国学术越来越‘‘欧化’“美化”，其原因就在这里。这不是说，中国学者不是在做中国学术，而是说，有更多的中国学术变成了西方学术的传声器：套用西方方法、论证西方结论、用西方语言说话，甚至直接重复西方话语……学术要求思考，思考是批评的第一步。中国学术不能再人云亦云，不能再唯‘‘外”是从了。现在缺少的正是思考，是在思考基础上的分析与批判，这是当前中国学术最大的障碍。现在的中国学术不是无知，而是没有自信，中国学术应当构筑自己的话语了。
这里对“唯外”的这种现象，批评得非常有道理。艺术学界这种现象也是非常突出。总以为西方人的着作、理论、概念以及表述方式，都是先进的，不用几个西方的概念和理论，就显得自己落后。西方美学中提出了‘‘实践美学”，故此改头换面地跟风，提出了—个所谓的“应用艺术学理论”。为此，艺术学理论学科主要创始人之一，张道一先生批评到：“艺术学研究艺术理论，指导艺术实践，它虽然也带有思辨的成分，但不是思辨型的学科，也不可能将艺术分为理论艺术学和应用艺术学。
艺术学理论研究方法，除了我们指出的从形而下的作品作为切入点外，还有就是最普通的一种研究方法，即归纳法。前面我们用了“三原色”原理来形容艺术学理论需要打通美术、音乐和舞蹈这三门艺术种类的道理。就是说，至少我们应该把美术、音乐和舞蹈的共性探讨、研究和分析出来，从这些种类的艺术创作中，寻找到它们的规律和共同的原理。张道一先生曾经反复做过这样的比喻，他说艺术学（即现在称“艺术学理论”）就像水果，水果是抽象的，看不见，摸不着，但又存在着，经常提到它。我们常说“吃水果”。这句话对，也不对。抽象的水果怎么吃，只能吃具体的苹果或香蕉。这就如同其他艺术的门类，如美术、音乐、舞蹈、戏曲戏剧、影视等，是具体的艺术种类。就像苹果、香蕉、梨子、葡萄等，是具体的水果种类，它们为何叫水果，因为它们有‘‘水果”的共性特征。艺术学理论就是要通过这些具体的艺术种类，找出它们共性的东西。为什么美术可以称为艺术，音乐可以称为艺术，舞蹈可以称为艺术，戏曲戏剧、电影电视、设计等都可以称为艺术。
说明它们有共同的原理性的东西，才能被称为‘‘艺术”。归纳出共性的东西，研究原理性的特征，这就是艺术学理论的方法。一旦我们掌握了艺术规律和原理，就可以用这些原理性的和规律性的艺术学理论指导艺术创作实践了。往往有的研究者，过去的学术背景可能是某一种类的艺术，如美术、音乐、设计、舞蹈、影视、戏剧或戏曲等等。在从事艺术学理论研究过程中，如果只限于自己的专业背景，就可能会成为门类艺术的理论研究。局限在美术中，就可能成为美术学的理论研究；局限在音乐中，就是音乐学的理论研究，以此类推。这些都不是艺术学理论的研究。简单地讲，毕竟还有一个学科的问题。从学理上讲，如果没有打通艺术的种类，缺乏归纳的方法，没有整体的宏观学识视野，就做成其他的门类学科研究了。目前艺术学理论博士论文的开题，都会遭遇这个问题。有的艺术学理论博士生论文，不符合学术要求，开题报告跑到别的学科去了，做成了诸如美术学、设计学或戏剧戏曲学等等。
从这个角度讲，艺术学理论对研究者来说，必然有学科的学术要求。既然是用综合的、宏观的和整体的学术研究方法，行之于艺术的分析、揭示和诠释中，就要求从事艺术学理论的研究者，‘打通”艺术学的各个门类的一级学科，使研究者的思维来回贯穿于各门类艺术创作实践中，及其各自的历史中和现象中。中国有句俗语，叫做‘‘隔行如隔山”，意思就是一行不同一行，差异很大。譬如美术和音乐，表面上看，二者根本不搭边。但同时，中国还有一句俗语，叫做“隔行不隔理”，意思就是说尽管各行不同，不搭边，但是道理是相通的。某种程度上讲，艺术学理论探讨、研究、分析和诠释的就是这个“隔行不隔理”中的这个“理”。研究者能够基于几个艺术种类，再打通这个“理”，基本上就能够有“一通百通”的学术能力了。只有“通”了，才能归纳出‘‘理”来。由此可知研究方法，需要看研究者的学术能力之所及。也由此而知，艺术学理论的研究，对研究者的要求较高。
三、对象、材料和理论结构
艺术学理论的对象、材料和理论结构问题，是研究艺术学理论研究运用方法的问题。绘画、雕塑、设计、音乐、舞蹈、戏剧、戏曲、影视、曲艺等等，从整体、宏观和综合的方面说，它们是艺术学理论的研究‘‘对象”；从具体研究的角度讲，它们是艺术学理论研究运用的‘‘材料”。一定要注意，我们这里对“对象”和“材料”用法和区分的描述。我们可以说，艺术学理论的研究对象就是艺术，因为我们在研究雕塑或乐曲作品时，我们可以笼统地说这个研究对象是艺术。但是，当雕塑或乐曲作为具体运用的“材料”时，即在具体地如何运用这些“材料”时，却关系到是否属于艺术学理论的研究。换句话说，当我们运用和选取这些“材料”时的不同方法，不同用途，不同目的，是区别其是“艺术学理论”研究，还是“美术学”研究、“音乐学与舞蹈学”研究、“设计学”研究，或“戏剧戏曲影视学”研究的重要标志。
有的学者认为，所用的“材料”探讨的是艺术原理性的问题，规律性的问题，即使用的一个门类的“材料”，都属于艺术学理论的研究。这种观念大体是正确的。说大体是正确，是因为在认识艺术学理论的学理方面是正确的。但是不完整，有缺陷，关键点还是“材料”单一，缺乏说服力。譬如仅仅使用书法作品作为艺术学理论研究的材料，某种程度上可能只会解决书法方面的一些问题，即所探讨书法艺术的规律并不具有普遍性。如果仅仅用绘画艺术作为材料，研究的结果，同样只能说明绘画的问题，可能连雕塑的问题都解决不了，也很难得出一个具有普遍性的规律来。以此类推，同理可证。虽然说研究者的主观愿望是基于艺术学理论的宏观、综合和整体的把握艺术本质和规律问题，但是受其所使用的“材料”局限，很难得出一个具有普遍性的结论来。而且，单一的‘‘材料”也容易被人质疑，或被理解为某个种类的如音乐学或美术学的理论研究。因此，对“材料”的占有、分布和运用，关系艺术学理论研究的成果是否具有普遍性，是否能研究出原理性的问题来。同时也可以以此印证，是否是艺术学理论这门学科的研究。材料的全面性和典型性便是决定艺术学理论研究的基础。艺术学理论的研究材料，尽可能涵盖所有的艺术种类，至少要涵盖美术、音乐和舞蹈这三方面的作品，用这三方面的作品作为研究对象，同时作为材料，归纳和印证出所研究的实质性问题。在所有被运用的材料中，为了围绕研究的问题，研究者就不能再按照艺术的“分类”来组织材料，而是依据研究的问题“重新”组织材料。从这个角度讲，美术、音乐和舞蹈的作品——材料，就是被打“乱”的，不是按艺术种类组织材料。研究者必须明白，这里没有‘‘种类”(“门类”）之分，唯有总体的艺术作品或艺术材料。
这里就涉及一个材料和理论结构先后的问题。即使不涉及先后问题，也涉及材料与理论结构的关系问题。应该注重的是首先掌握大量的材料，只有拥有了大量材料，才能做研究工作。但是，一些研究者却先框定一个所谓的理论体系，然后根据需要再来补充材料。这样“先入为主”的做法存在一个问题，就是忽视或遮蔽另一些材料的存在，或者选取材料时为我所用，容易走向片面或极端。前面我们就讲到‘‘形而下至形而上”的方法过程，这个逻辑发展下来就是以材料和对象为依据，即依据艺术创作和艺术现象，去发现和研究问题，研究艺术的规律和原理，研究艺术与人的关系，研究艺术与思想的关系等等。因为只有艺术发生了，我们才有可研究的对象和材料。所以，艺术学理论的理论结构是从艺术创作、艺术现象中去发现问题，探讨艺术的规律和本质，研究艺术与社会、艺术与人的问题。同时，我们要看到的是，从事艺术学理论的研究者，对材料的掌握和运用本身是一种学术能力的表现。对于没有艺术实践经验的人来讲，面对研究的对象——艺术，是麻木的，掌握起来要困难一些，运用起来会吃力一些。没有良好的艺术感受能力，对艺术材料也就没有什么感觉。艺术作品的精奥也会因没感觉而遮蔽，驾驭不了丰富的艺术材料。因此，我们反复强调从事艺术学理论的研究者，自身需要懂得艺术，最好具有一定的艺术实践经验。
四，结语
任何理论的有效性至少体现在两个方面。一是研究者使用的方法正确，得出有效性的结论，并能有效地解决艺术问题；二是任何研究出来的新理论，本质上又是一种理论的方法，在于有效地对未知领域的研究运用。当然，前提是前者的有效性，再向前推，就是一个正确的研究方法。正确的研究方法来自于正确的思考。我们在探讨艺术学理论的研究方法时，也涉及其他相关问题的探讨。譬如学科问题，分类问题。学科的分类在于明晰制定教育方针策略和教育措施的践行，也在于确定研究方向和研究范围，更形而上—点，也在于教育制度的确立。“艺术学”为什么要从原来的“文学”中分离出来成为一个大的门类学科，下设5个一级学科（当然5个一级学科是否合理，还可以再探讨），说明了这是中国教育制度和教育方针的进步，也是在学理上把“乱辈”的现象梳理了一下。从学理上讲，文学应该属于艺术的范畴之中。尽管“乱辈”现象还没有彻底被清理，但比起“儿子”成为“老子”要好得多。既然我们已经确立了艺术学的科学范围和对象，在学科的建立中，就需要遵守这个学科的基本要求和规范。但是，大家在分蛋糕——申报硕、博点的时候，规矩方圆被任意切割。蛋糕是拿到了，可是接下来研究的时候，成了各唱各的戏，想怎样做就怎样做。我们不反对交叉学科的研究，反而鼓励交叉学科的研究。学科交叉会成为一些新的研究方向，甚至出现一些新的学科。为此，张道一在建立‘‘艺术学”时，早就思考到了这个问题：
(一)艺术思维学——这是艺术学与思维学交叉结合的学科。
(二）艺术辩证法——这是艺术学与唯物主义辩证法交叉结合的学科。
(三）艺术伦理学——伦理学属于哲学的一个分支，也称“道德学”，是研究人的道德义务的科学。艺术伦理学的建立，既为艺术理论增添了道德哲学的支柱，也充实了艺术的内容。
(四）艺术社会学——社会学是以社会为统一体而进行研究的一门科学，主要研究人类的社会生活及其发展、社会的本质、社会进化的过程及其原理……艺术社会学是将艺术学当做一种重要的社会活动来研究，有助于在不同的社会中对艺术进行定位，从而发挥艺术的功能。
(五）艺术心理学——心理学是研究心理规律的科学。艺术心理学从艺术的角度研究各种心理活动。
(六）艺术文化学——文化是一个大概念，不论是广义的解释还是狭义的解释，它所包括的内容都很广。艺术是文化的一部分。艺术文化学是在文化的大背景、大范畴内通过比较研究，展示艺术的特点和作用的。
(七）艺术考古学——艺术考古学是艺术学和考古学的结合，它不仅为艺术的研究提供了有价值的资料，使艺术史更加充实丰富，并且也有助于考古学的发展。
(八）宗教艺术学——宗教是一种历史现象，是一种社会艺术形态，它伴随着人类的发展而成为一种信仰。宗教艺术学是解释这种历史的现象，阐明艺术以宗教为载体、宗教利用艺术形式的社会影响及其自身的发展的科学。
(九）艺术市场学——市场学的基本概念与基础知识，市场经济，信息，经营与策略票房价值与经纪人，附加价值。
(十）工业艺术学——在现代社会中，工业在国民经济中占有主导地位。工业艺术学既带有综合的性质，又是一个新兴的学科。
临床教师不断地改革和完善教学内容和方法当前,随着科学技术的不断发展,医学领域也获得了突飞猛长的进步,特别是分子生物学研究技术的出现、发展和完善,人类基因组计划的超常规发展,医学知识日新月异,人们对疾病有了全新的认识,临床诊治和预防水平有了很大提高,人类疾病谱也发生了很大的变化,现有的教科书和教学大纲已很难跟上现代医学的发展,因此必须紧密结合医学发展的动态来积极开展临床医学教育。以妇产科疾病的教学为例,妇科腹腔镜是融现代妇科手术和内镜诊治技术为一体的微创伤妇科诊治技术,也是当今妇科领域的一门新兴学科。妇科腹腔镜技术的兴起与发展,使传统的妇科诊断与治疗发生了前所未有的深刻变革,并在很大程度上影响和改变着妇科诊疗的面貌,为新世纪妇科技术的发展带来了光明前景。同时新技术的发展非一蹴而就,而是多因素共同作用的结果,所以妇科腹腔镜技术也正是在发展中完善,完善中发展!这就要求临床教师必须根据这些变化及时调整授课内容和学时安排以满足这些变化,学习内容和临床实际的脱节不能满足现代临床医学教育的目的和宗旨。
科学技术的迅猛发展使得人们的沟通途径也变得十分畅通和便利,互联网的出现和不断完善,人们获取知识的途径变得非常快速和直接,也为总结和分析医学发展的动态提供了更多更全面的第一手资料,现有的教科书很难全面反映医学发展的实际情况,这给现代医学教育提出新的挑战,它要求临床医学教师必须不断学习和掌握相关知识,及时跟上医学发展的步伐和满足学生的学习需求,固步自封、不思进取则要被现代医学所淘汰。随着国内市场经济的不断发展和完善,医疗市场也较以前发生了很大变化,病人就医有了很大的选择性,对医院和医生乃至诊治方案的选择有了更多的自主性,同时人们法律意识和自我保护意识也在不断加强,因此医院和临床医生在日常医疗和教学活动中必须尊重病人的选择权、知情权、隐私权等有关权利,这给临床医学教学提出新的挑战。如果不能正确处理医疗和临床教学的关系,将不可避免地产生一些医疗纠纷甚至是法律纠纷,也使医院在医疗市场的竞争中产生不利因素,反之,如果处理得当,不仅有利于医学教育,也有利于提高医院和医生自身的声誉,而在医疗市场的竞争中处于不败之地。目前我国相关法律、法规也还不完善,滞后于目前医疗形势的改变,如何确保临床医学教学的正确和合理、合法地开展,不仅是临床教师所必须关心的问题,而且涉及到相关法律、法规的制订和完善。因此既往临床医学教育模式和教学方式、方法已不符合当前医疗市场的变化,作为临床教师,应提高法律意识,正确处理好医疗和教育的关系,取得病人和家属的配合来积极开展临床医学教育,为培养新一代临床医生和拓展医疗市场而积极努力。
医学教育模式的改革也给临床医学教师提出了新的要求。学生的临床课程将在临床医学院内实习时同步进行,学生的大部分课余时间在医院度过,学生将有更多时间与病人接触,这有利于提高临床医学教学质量和学生的综合素质。但如何利用学生在医院的时间培养学生正确和基本熟练的临床思维和处理能力,也给临床教师提出了新的要求。旧的教学模式下教师按病种讲完课或带完见习后便完成任务这种情况将一去不复返。学生在医院内与病人接触,随时会遇到各种各样的问题和困惑,包括医学、心理学和社会问题,甚至语言问题,这都要求临床教师花许多时间来解释和教导。单一按病种来讲习对学习临床课程是最基本的,如果没有这个基础,学生的临床能力无从谈起,但对一个合格的临床医生来讲,仅做到这一点是远远不够的。教师在平时的讲课和学生见习、实习过程中,应结合学生的自学和接受能力,把疾病的临床特点、诊断、鉴别诊断和治疗作为教学重点,并把它灌输于整个教学过程中,而疾病的病因学、发病原理和病理解剖等基础内容可简单地讲解或由学生自学,这样有利于学生临床思维的培养和处理问题能力的提高。因此在临床教学活动中可以以临床症状为主线多讲解,在此基础上再深入讲解具体疾病各自的特点和处理要点。另一方面,在以前的教学模式下,往往对学生的临床基本功重视不够或无法给予更多的教导,而在新的教学模式下,学生在见习、实习过程中,我们认为临床带教老师要用一定的时间来训练学生的临床基本功,如采集病史(包括内容和技巧)、体格检查和临床基本操作等,并作严格要求,因为扎实的临床基本功是一名优秀临床医生的基础。另外,要做好一名优秀医生,必须了解病人的心理状态,与病人之间的接触、沟通是非常重要的,这对于了解病情同样也是缺不可少的,在这方面也要求带教老师予以重视。因为一名医学生或年轻医生,在这一点上往往欠缺和难以领悟,需要在临床医疗活动中不断充实、完善。
二、临床教师自身综合素质要进一步提高
为提高教师的授课能力和效率,我院已多次开设青年教师授课大奖赛,并对刚毕业的青年教师进行岗前培训,使临床老师的授课能力得到了提高。要作好一名优秀的临床教师,不仅要培养高素质的临床医生,还要培养学生正确的临床思维能力包括临床诊断和处理能力,单纯地提高授课效率是远远不够。首先必须要有强烈的责任心,不能敷衍了事。对于一名临床医生,要带教一、二名学生并不是一件难事,难就难在认真和带好二方面,没有一定的责任心,不认真带教是很难培养出优秀医生的。一名好医生不等于是一名好老师,要做好一名临床教师,除做好自己医疗和科研的工作外,还必须负起责任,认真培养下一代医生,才能使我国临床医学不断发展和进步。其次,带教老师必须提高自己的知识水平。因为医学发展迅速,知识更新快,人们获取医学知识途径既多又直接(包括医学知识讲座、书籍杂志、通信、互联网等形式),这要求任何一名临床医生都必须不断学习和钻研,这样才能在医学界立于不败之地,对临床教师而言尤其重要,只有自己不断进取,才能满足学生的学习要求。因此,一名好的临床老师首先必须是一名好医生。
三、积极开展丰富多彩的临床教育形式,以满足学生的学习需求
各位领导、各位来宾、老师们、同学们：
大家好！
今天是我们2003级研究生开学典礼的日子。在这个十分激动值得纪念的日子里，我谨代表2003级全体研究生向学校各位领导、老师及全体教职员工致以崇高的敬意！
首都医科大学是一所历史悠久、专家云集、教学科研力量雄厚，医疗技术水平高超，国内知名的医科大学。在“重教勤学、尊师爱生、艰苦奋斗、求实创新”校训的激励下，经过艰苦拼搏，**大人才辈出，硕果累累。我们有幸成为其中的一名学生，心中感到无比自豪。
同学们，学习机会来之不易，我们应当倍加珍惜，学有所成。在今后的学习过程中我们应该做到：
第一、明确目标、虚心好学、博采众长
研究生的学习是高层次的学习，这种定位要求我们必须树立明确的专业目标，首先应该掌握好自己的专业知识，而且要掌握求取知识的方法。不仅要完成自己的课程学习，而且应该有意识的培养锻炼自己独立的科学思维能力；不仅要深入学习本专业、本学科，而且要广泛涉猎其它领域，医学模式的转变要求我们懂得更多的社会科学边缘学科，比如心理学、伦理学、卫生法学等。只有博大，才能精深，这样我们才能成为一名既精通本专业又相关知识丰富的名符其实的医学工作者。
第二、学以致用、勇于开拓、善于创新
我们知道现代社会越来越注重能力的提高，而不再是资历、学历。我们不仅要掌握专业知识，更应具备运用专业知识的能力。在认知过程中学会思考、学会实践，始终遵循实践——认识——再实践——再认识的认识运动总规律。同时我们应该培养自己的创新能力、协作能力、交流能力和管理能力，而不是只局限在书本知识之中。
第三、提高素质、加强修养、接受挑战
没有高尚的道德情操，不可能成为一名真正能推动社会进步的人。古语云：医者仁术也。作为未来的一名合格医务工作者，我们不仅应该具备精湛的专业技能，而且还要具有高尚的道德情操。各位同学，我们在即将的学习生活中，应该严格要求自己，努力规范自己的言行，提高自身的思想素质，健全自己的人格，培养自己的责任心与使命感，树立良好的医德医风，在医学实践中不断升华自己的精神境界，为把我们培养成一名德艺双馨的医务工作者而努力。各位朋友，经过SARS的考验我们深深的感受到了肩上责任的重大，祖国和人民的殷切期望，让我们团结起来，以“三个代表”为指导，艰苦奋斗，求实创新，抓住机遇，在21世纪建设祖国的浪潮中奏响我们青年的乐章。
同学们，今天我们共同走进了我们向往已久的医科学府，我们将谨记校训，立志成才、勤勉刻苦、决不辜负老师对我们的殷切希望，同学们，作为一名立志报效祖国的医务工作者，你们做好准备了吗？
关键词口腔医学专业；学生；法律意识；法律教育
一、口腔医学专业学生法律意识现状
（一）法律意识淡薄目前越来越多的九五后青少年开始步入医学院校，这个年龄段的大学生大多属于独生子女，依赖性较强，在刚刚结束紧张的高三学习生活后，又来到一个学习生活更为紧张忙碌的医学院校，往往需要度过一个较长的心理适应期。而在这样一种延续性的忙碌学习过程中，法律知识的学习很容易被忽视，更谈不上应用，导致普遍性的存在法律意识淡薄。（二）医学院校法学教育充斥着应试色彩医学院校课程设置中医学基础课和专业课占了绝对的比重，人文社科类课程比重较轻。大多数医学院校的法学教育是通过《思想道德基础与法律修养》这一门课进行的，传统的课堂教学方法加上考核方式，难以让学生真正掌握相关法律知识，而针对职业能力的实用性法律知识讲授更是很少，学生很难做到通过学习将法律知识转化为实践技能，更谈不上在执业过程中自觉运用法律知识防范和处理医患纠纷等复杂法律事务。（三）口腔医学专业学生法律教学理论与实践脱节目前，尚无专门针对口腔医学专业学生的法学课。法学教师在授课过程中，通常注重法律条文的讲解，忽视法条背后的原理、方法，学生较少确切理解某个法律条文的真正要义。口腔医学专业学生不同于其他临床专业学生，在校期间的实习见习就需要在相对独立的空间独自面对病人，是医学生中较早直接接触临床的一类学生，面对日益纷繁的医患关系，尚未走出校园的学生往往显得无所适从。
二、口腔医学专业学生法律意识养成应有的教学内容
（一）基础法律知识教育根据医学专业的培养计划和目标，应该确定相应的法律知识教育教学规范大纲。包括法律原理的学习，主要指的是为法律规定提供基础性、准则性、规范性指引的理论；法律基本知识，主要包括宪法和一些大部门法，如刑法、民法、诉讼法、行政法等；医学生专业法知识教育，即卫生法、《中华人民共和国传染病防治法》、病历书写要求、处方质量要求、医疗安全教育、《中华人民共和国执业医师法》、《医疗事故处理条例》等；运用卫生法学实践知识，医学生能够将所学医学和法学知识融会贯通，形成合理的知识架构，在医疗过程中自觉运用法律思维、法律知识规避风险，解决问题。（二）实习前医用法律知识教育口腔医学是实践操作较多的一个学科，实习生要从课本的学习中迅速转到临床操作上来，即便是有带教老师的指导，但也需要面对病人独立操作，即使是一开始最简单的“牙拔除术”、“根管治疗术”也具有不可逆性，学生通常会存在一定程度上的不自信，加上患者的不信任以及对新出台的医疗法规的不确切理解，都会带来带来一定程度上的实习困难。因此学生进入临床实习前，除打牢专业基础课知识外，还应强化医事法律学习，需要通过讨论教学法、案例教学法、辩论教学法、专题教学法等四大教学法对学生进行：1．语言交流培训，学会聆听患者的述求，从中准确把握患者表达的信息，同时向患者或家属介绍病情以及可能发生的风险和医疗行为中会采取的相应措施，又不至于让病人感到害怕；2．强化《医疗机构病历管理规定》学习，严格按照《医疗机构病历管理规定》书写病历；3．初步具备一定的法律能力，包括法治思维、法言法语表达、对法律事实的辨析能力。以便学生更好掌握与病人沟通交流的方法。（三）贯穿始终的法律教育要让学生真正遵纪守法，灵活运用法律，就要在学校营造依法治校的良好人文氛围。1．教师在授课过程中要突破传统教学模式的藩篱，将法学教育成为医学生人文素质培养的一个重要部分，通过案例教学、PBL讨论、模拟法庭、实地参观等多种形式完善法学教育。2．充分发挥学校文化的积极效应，通过宣传栏、校园网、校刊以及一些新媒体如微博、微信公众号适时传播法律知识，使法律意识在潜移默化中进入医学生的大脑。3．发挥学校团委、学工部门、心理辅导站的作用，通过职业规划大赛、心理讲座等形式引导学生专业认同感，养成良好心理素质。4．开展丰富多彩的校园活动，举办专家讲座论坛介绍卫生法律实际运用案例，组织以法律为主题的演讲比赛、辩论赛、知识竞赛、主题班会等，还可结合专业在雕牙比赛、科普大赛作品征集、临床实践技能操作和病历书写知识讲座和比赛中宣传法律知识，使医学生在此活动中逐渐增强法律意识。
三、口腔医学专业学生法律意识养成教学体系的建立
根据上述内容，即基础教学部分、临床实习前教育、日常法律意识养成教育三部分，通过理论课教学、实践教学、校园文化活动三个部分，形成口腔医学专业学生法律意识养成教学体系。见图1。教学体系形成后，各教学内容应分别占什么权重呢？为进一步明确各项教学内容所占权重，笔者从法律知识、法律道德、法律观念、法制能力、法律心理等5个部分设计《口腔医学专业学生法律意识问卷》。本次调查共向600名口腔医学专业的学生发放问卷，回收有效问卷528份，男女比例为1:1.25，其中，一年级学生113人，二年级学生125人，三年级学生146人，四年级学生112人，五年级学生104人。通过调查发现：口腔医学专业学生法律观念普遍形成，相关的法律知识掌握较差，在日常生活中自然产生的法律道德情况良好，但法律能力几乎都未形成，更谈不上上升为法律心理，不习惯于通过法律的思维模式去面对解决问题。因此按如下权重设置口腔医学专业学生法律意识养成教学体系内容权重划分。随着我国医疗卫生行业制度的规范化，医学生的法学素养成为一名合格医学生不可或缺的素养之一，该系统可以及时调整教学大纲，在课程设置上不但覆盖该大纲要求，且在深度和广度上更上一层，具有较强的针对性，将医学和法学融为一体，较之以往传统授课方式更具有科学性和操作性。
参考文献：
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[4]冯玉芝．医学生法律素质教育的途径与措施．辽宁医学院学报．2007（2）．
[5]张鹏．论加强医学生法律素质教育的对策．西北医学教育．2009（10）．
[6]向泽敏．加强医学生法律素质教育的思考．新课程．2009（10）．
【摘要】 在细胞内部，当黏着斑激酶（focal adhesion kinase， FAK）受到细胞外刺激时，即被激活而发生磷酸化，磷酸化的FAK激活下游的因子而改变细胞行为。FAK是细胞内部重要的信号转导分子，它在信号从表面受体转导至细胞核过程中起到关键作用。这样， FAK与细胞内多种分子相互作用，进而参与了多种细胞功能的调节，如细胞的扩散、迁移、细胞增殖、凋亡和细胞的存活，在法医学上研究FAK也必将具有十分重要的意义。
【关键词】 法医病理学；黏着斑激酶；损伤；时间推断
黏着斑激酶（focal adhesion kinase， FAK）是非受体蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinase， PTK）的一种，主要分布在胞浆中，起着介导细胞黏附、迁移、生存及细胞周期调控等重要作用。FAK与其他信号转导途径的相互作用机制及其在细胞凋亡中的作用特点是近期研究的热点，本文综述FAK在组织损伤中的研究进展及其法医学意义。
1 FAK的生物学特点
1.1 FAK的结构
FAK也称pp125FAK， 1992年由Hank等从v-src转染的鸡胚成纤维细胞中克隆鉴定出来，因与细胞粘附关系密切，故命名为黏着斑激酶（FAK）。Pyk2 （ Protein-rich tyrosine kinase 2） 是一种富含脯氨酸的非受体酪氨酸蛋白激酶2，又称细胞粘附激酶β（CAKβ）；相关粘着斑酪氨酸激酶（RAFTK）；Ca2+依赖性酪氨酸激酶（CADTK） 或粘着斑激酶2（FAK2） ，是FAK家族的新成员，分子量为116kD。
FAK可分为三个功能区：N-端区、激酶区和C-端区。其中C-端区的第856-1012位氨基酸构成黏着斑的定位区（focal adhesion targeting， FAT）是FAK结合到黏着斑（FAP）上必要的序列［1］。FAK有6个可磷酸化的酪氨酸位点，即Tyr397、Tyr407、Tyr576、Tyr577、Tyr861、Tyr925。C-端区还有两个富含脯氨酸区域。Tyr397是主要的自主磷酸化部位，与Src家族直接作用。Tyr576和Tyr577是Src家族激酶磷酸化的主要部位。磷酸化的Tyr925可与生长因子受体结合蛋白2（growth factor receptor binding protein 2， Grb2）结合。Tyr407 和Tyr861可能是与其他SH2（Src-homology 2）蛋白结合的部位。位于C-端的两个富含脯氨酸区：PR1和PR2，是含有SH3结构域的蛋白质的结合部位，如Cas（Crk-associated substrate）等。这些C-端区域都是FAK发挥信号功能的关键部位［2］。
1.2 FAK信号传导通路的激活与细胞周期调控机制 Zhao J等［3］发现NIH3T3细胞中FAK突变体通过与内源性FAK竞争结合黏着斑处的信号分子（如Src），可导致细胞周期停滞于G1期，揭示FAK在调节细胞周期中的作用。同时应用cyclinD1启动子荧光酶分析，证实FAK在转录水平调节cyclinD1表达。活化的cyclinD与细胞周期蛋白依赖激酶4/6 （cyclin-dependent kinase4/6， CDK4/6）结合，磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白，导致原与去磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白结合的转录因子E2F-1/DP-1异二聚体释放，激活与S期DNA合成相关基因的转录，使细胞进入S期。这样，FAK参与完成一个细胞周期的调节。
整合素（integrin） 是一类重要的细胞表面受体家族，其与细胞外基质（ECM）配体结合后，促使黏着斑形成。整合素β1、β3和β5亚基的胞质端与FAK的N端区结合，从而引起FAK构象的改变，使激酶结构域处于活化状态。同时，Tyr397自身磷酸化，消除了Src的自体抑制，活化的Src催化FAK的Tyr407、Tyr576、Tyr577和Tyr925磷酸化，使FAK完全活化，FAK与Src结合形成FAK/Src复合体后FAK被激活，激活的FAK一方面磷酸化桩蛋白（Paxillin）和Cas的酪氨酸残基，通过接头蛋白Crk的SH3区与C3G结合，而C3G是公认的Ras鸟苷酸交换因子，进入Ras途径；另一方面，FAK/Src复合体导致Tyr925磷酸化，磷酸化的Tyr925处肽模体TENN可与另一种接头蛋白Grb2结合，Grb2的SH3结构域可与另一种鸟苷酸交换因子SOS（son of seven-less）结合，进入Ras途径 ［4］。由此可见，磷酸化FAK通过以上两种途径均可激活下游的因子，完成FAK信号传导过程。
2 FAK信号传导通路的法医学意义
目前学者对FAK信号传导通路研究，主要涉及中枢神经系统损伤、皮肤损伤和骨骼肌损伤等。FAK信号传导通路在这些组织损伤中的作用特点与规律应用在法医学上，具有十分重要的意义。
近年来，有关脑缺血再灌注损伤和脑创伤的研究较多，研究者认为细胞信号传导参与调节中枢神经系统神经细胞的损伤。Ziemka-Nalecz等［5］建立沙鼠前脑短暂性脑缺血损伤模型，利用Western blot杂交法和原位酶谱法，发现伤后3h磷酸化FAK蛋白表达量升高，6h为表达高峰，其后开始下降；伤后3hFAK/p130Cas（一种接头蛋白）复合体表达量上升，6h达到高峰，到72h降至基础水平，正常对照组未见阳性表达。因此，损伤可使脑组织细胞内的FAK激活，作为早期细胞内参与这一应激反应的调节，其表达具有一定的时间规律性［6］，可将其作为一种客观指标进行研究，用于法医学鉴定中脑损伤时间的推断。
皮肤损伤是法医学实践中常见的损伤之一，通过皮肤损伤推断时间在法医检验中占有很重要的地位。Roy等［7］发现在8周幼鼠背部皮肤切口周边区内源性低浓度的H2O2诱导FAK双位点（Tyr861＆Tyr925）磷酸化，其他位点对H2O2不敏感。活化的FAK通过多种机制调节血管发生，如肌动蛋白应激纤维／黏着斑形成、加强血管内皮细胞屏障作用、促进血管内皮生长因子释放及调节整合素敏感信号通路等，对皮肤损伤愈合起到了关键作用［8，9］。
骨骼肌损伤在尸检过程中也极为普遍。Peng Xu等［10］利用FAK转基因大鼠后肢骨骼肌缺血损伤模型，借助免疫组织化学和数量分析的方法，发现股动脉结扎4周后，FAK转基因大鼠骨骼肌产生大量新生血管，并且与对照组有显著性统计学差异［11］。骨骼肌损伤后再生是一个复杂的过程，包括卫星细胞的活化、迁移、溶解和损伤的肌纤维再生，血管内皮细胞中FAK大量表达能够促进缺血损伤处血管的新生，有利于大鼠骨骼肌损伤后愈合［12，13］。因此，FAK的表达有一定的时间规律，可作为诊断肌肉损伤和推断肌肉早期损伤时间的一项指标。
3 应用展望
在法医工作中组织损伤较为常见，法医学者长期以来一直致力于寻找损伤后短时间内出现的各种能推断损伤时间的指标，尤其是生前损伤后存活时间短暂，损伤形态学改变不明显，损伤时间难以确定的案例。以往多通过观察生理反应和蛋白质定量检测等方法推断，但对伤后存活短暂，尤其伤后8h内存活时间的推测还有待于进一步研究。目前国内外有关FAK信号通路在组织损伤中的时间规律性变化的研究还较少，尤其在法医学领域用于人体损伤时间的推断有待于进一步的探讨。FAK信号传导通路在组织损伤后早期即激活。损伤后短时间内，FAK表达显著且具有时间规律性。因此，FAK信号通路应用于法医学上将有重要的意义。
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出所有vh；ii组微量取样50 l，连续取15次；iii组左眼一次取样。右眼微量重复取样
。iv组双眼第1次微量取样．剩余一次
取出。检测ca2+cl 、l(+、na 和p等含量，数据统计分析。结果 iii组左右眼、(iv)组先后两次取样配对t检验无差异(p>0
．05)，
各组微量取样样本的变异系数、双眼差较小。结论 微量取样的操作影响较小、稳定性和重复性好
． 更适合法医学研究和应
用。
【关键词】尸体化学；玻璃体液：取样方法：比较
【中图分类号】d919．1
【文献标识码】a
【文章编号】1007—9297(20__)03—0208—03
a comparison study of vitreous humor micro-sam pling and wholly sam pling on rabbits． zha ng yu—zhuj，w a ng lan2．3．
liu l ，(department offorensic me dicine，ton#ji medical college ofhuazhong university ofscience arm techno ，w han
430030,chian)
[abstract]objective to make a comparative study of wholly sampling and micro-sampling of vitreous humor(vh)．
methods
【作者简介】战玉祝(1968一)，男，汉族，山东莒南县人，医学学士，副主任法医师
， 研究方向：临床法医学中的视觉、听觉的电生理研究以
及法医病理的死亡时间研究；tel~+86—531—86323203；e-mail：james6803@21cn．com
【通信作者1刘良(1960一)，男，汉族，山东沂水人，教授，博士生导师，主要从事法医病理学教学
、研究及检案。
法律与医学杂志20__年第13卷(第3期)
thirty—six rabbits were divided into four groups，each of which contains nine．all were sampled at 12h postmortem．group 1 were
wholly extracted． group i1 were subjected to multiple sampling． of group iii， all left eyes were wholly sampled and all right eyes
were micro-sampled．all eyes of group iv were micro—sampled at first and all the left were wholy sampled．concentrations of calcium，
chloride，potassium，sodium and phosphorus were detected and statistically analyzed．results th ere are no significan t difference
between wholly sampling and micro-sampling of the pair-matched t—test of between-eyes in group iii and the twice sanipiing
in group iv．of micro—sam pling，the variations of the both-eyes and coeficient of variation were smaller than those of whony
sam pling． conclusion th e multi-micro-sam pling operation makes much less distort on vh， and is more stab le and repeatable，
which is promising for forensic vh study an d examination．
【key words l postmortem chemistry；vitreous humog sampling methodology；comparison study
取样方法对玻璃体液(vitreous humor，vh)研究
有重要意义，[11传统采用一次取样vh，近年有研究使
用了微量取样。迄今未见两取样方法比较研究，本实
验通过一次取样与微量取样的比较． 旨在为vh研究
选择取样方法。
材料与方法
一
、实验动物及分组取材
健康家兔36只，雌雄混用，体重1．9～2．5 ，由华
中科技大学同济医学院实验动物中心提供。耳缘静脉
空气栓塞处死，置于4～7℃恒温箱，随机分为4组(每
组9只)，于死后12h取样：i组根据coe推荐的方法，
用20g针头5 iill注射器自外眦、角膜缘外约2 mm
处缓慢进针，瞳孔观察针头位于中央时缓慢抽出所有
vh，摇匀后移液50 l与去离子水1：4稀释，编号入
ep管、-25℃冻存。ii组微量重复取样：用20 g留置
针，入针后固定针头，用1 ml注射器缓慢抽吸、移液
50 l，重复取样15次，其余处置同i组。iii组左眼一
次取样，同i组，右眼微量重复取样同ii组。iv组双眼
微量取样1次，操作同ii组；换5 iid注射器一次取出
剩余所有vh，同i组。
二、检测
同日检测i组、iv组1、2次取样和iii组左眼样
本，ii组和iii组右眼第1⋯5 8 15次取样样本：37 ci=
水浴解冻，美国abboty aeroset 20__全自动生化分
析仪检测ca2+、cl一、i<+、na+和p浓度。检测3次，取平均
值。
三、统计分析
检测数据根据参考文献『31，采用excel和spss 12．0
分析软件进行统计分析：计算各组变异系数，ii组进行
方差分析，iii组左右眼配对t检验，iv组1，2次取样
配对t检验，分别计算iv组1，2次取样双眼浓度差与
双眼均值的比。
结果
实验所得结果及统计处理情况见表1、表2、表3。
表1各组变异系数(cv 。％)
table1 coeficient of variation in group i，ii，iii and iv (cv，％)
表2 ii组方差分析结果 值)
table2 variance analysis of group ii(p value)
表3 iv组双眼差(绝对值)与双眼均值的平均比(％)
table 3 ratio of average vanations to means in betweeneyes
of group iv(％)
讨论
一
、取样方法与变异程度
重复微量取样方差分析提示总体vh样本物质含
量无显著差异(表2)，iii组和iv组一次取样与微量取
样的t检验无差异(p>0．05)，因此两取样方法获得的
样本总体无差异。但是，一次取样的弥散程度大于微
量取样(表1)，这印证了coe关于“取样方法不当可造
成vh含量分散”的观点。这也反应在双眼浓度差上．
微量取样的双眼差较小、一次取样较大(表3)。
结果与有关报道都相吻合：一次取样研究报道的
· 210 ·
vh浓度变异程度和双眼问差异较大， 而微量取样研
究所报道的差异则往往较小。[7-91结合前期研究，[11分
析认为取样方法是造成差异的原因。物质在vh、血液
和组织中含量不同， 取样操作不当引起组织挫碎或污
染改变了vh样本含量。coe方法的缺点之一是“尽量
取出所有vh”不好控制．实际操作时容易抽出邻近组
织(如视网膜)，造成组分(如vh钾)含量的人为改变。
tagliaro[91也认为微量取样对眼球内壁组织的作用较
小．操作引起的损伤和组分改变也较小，取得的样本
更好。
二、微量取样的法医学意义
微量取样操作方法的文献少见，设计微量取样操
作时参考了coe方法的基本步骤。为方便多次取材、
减少进针次数、保持针头位置和尽量减少污染等，采
用了留置针固定后定量(微量)移液的取材方法。
tagliaro等[91 4次取样50 lvh获得了较好的死亡时
间推断精度，rognum等[111、poulsen等[121和bocaz—ben
eventi等【8】也采用微量取样的方法，并称死亡时间95％
预测区间更好。结合本实验结果。作者认为这与微量
取样的变异较小有关。微量取样所体现的较小的双眼
差，也更符合实际。111因此微量取样采集样本具有良好
的代表性，稳定性和重复性更好，也容易控制操作，更
适宜于vh的法医学研究与应用
综上所述，微量取样与一次取样总体无差别，但
不同取样操作可以造成样本均数变异系数的不同．比
较而言，微量取样的弥散程度较小，变异程度和双眼
差较小。微量取样操作对样本的影响较小，其稳定性
和重复性较好，更适合法医学vh研究应用
参考文献
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