发布时间：2023-02-21 06:18:55
序言：写作是分享个人见解和探索未知领域的桥梁，我们为您精选了8篇的高一数学学习计划样本，期待这些样本能够为您提供丰富的参考和启发，请尽情阅读。
【摘 要】学习高中数学，会有好些学困生，学困生产生的原因是什么？作为我们一线数学教师，对这些学生考生又如何转化呢？针对以上两个问题，本文主要略谈笔者对以上两个问题的几点看法。
关键词 学困生；转化建议
1.高中数学学困生的成因分析
1.1学习数学的意志、情感脆弱。好些高中数学学困生数学成绩不大理想的原因其实并不是他们的智力不好，而主要这些学生缺乏自觉意识和顽强的意志，缺乏学好数学的毅力和勇气，具体表现在:思想上，对待学习目的不明确、态度不够端正，认为学习的目的是为了应付亲人或应付老师的期盼和要求；意志、情感上，由于他们害怕困难、害怕挫折，因此害怕学习，不愿花精力和时间去啃稍难的题目，宁愿做一个学习上的懦夫；行为上，课前课后，从来不预习、复习课本内容，学习数学常常“三天打鱼，两天晒网”，不能坚持不懈，课堂上，老是希望老师直接将数学知识传授给自己，自己不愿意主动去思考问题、分析问题、解决问题，学习数学对老师的依赖性较强。
1.2学习思维问题。严密的逻辑性、概括性和很抽象等是高中数学最主要的特点。高中数学学困生的思维主要有以下几个特点：数学问题考虑的不透，即只能看到事物的表面现象，看不到事物的本质；不会读题、不会挖掘数学题目的隐含条件、不会灵活运用数学公式，只会死记硬背一些概念、公式、定理、定律等；思维较迟钝、呆板，相同的题目，优等生往往能举一反三，触类旁通，能较快的回忆起相关知识点，而学困生即使会也只是就题论题，做不到相应的联想和灵活的变通，多数时候是漏洞百出、顾此失彼，正因为如此，学困生往往学习数学时，思维缺少灵活性、创造性。
1.3学习方法问题。部分数学学困生也不是学习不认真、不努力，他们中也有好些人学习非常刻苦，甚至“争分夺秒、秉烛夜读”，但是数学成绩老是不突出，总结其主要原因是这些同学没有科学的学习方法。他们往往课前不会预习教材，课堂上不会听讲、不会思考，不会抓住知识重点、难点，课后又不会如何复习，对于老师讲解的知识只会机械的记忆，不去理解、感悟。因此，学习方法的不科学也造成他们学习数学困难。
1.4家长、教师问题。由于受高考升学的压力，无论是教师还是家长对学生的期望都很高，把学生的成绩都看的很重，数学学困生的基础原本就差，他们知识结构也不够完整，他们的思维也不可能在短时间内都达到较高的水平，他们在相对较短的时间内不可能完全掌握所学的知识并加以应用，这些都是客观情况，可是不少老师和家长，往往硬是给他们和优等生提出相同的要求，要求他们和优等生在相同的时间内要消化和吸收相同的知识，把他们在短时间内的成绩和优等生的成绩进行对比分析，这无疑脱离了这些学生的实际，无形中加大这些学生的心理承受能力，其结果是成绩不但没有提高，反而使他们害怕老师、害怕家长、害怕学习数学，甚至有时，他们为了满足自己的虚荣心和达到家长和老师的要求，考试时作弊，一旦发现后又要遭到他人痛斥，甚至学校处分，其结果一般只能导致心情压抑，产生自卑心理，从而缺乏自信，最终选择自暴自弃、放弃数学的学习、甚至学业。
2高中数学学困生的转化建议
2.1让学困生体验成功，激发他们学习数学的兴趣。成功是一种精神享受，更是激励人上进的助推剂，优等生需要成功，学困生更需要成功。高中数学教学中，作为教师应尽可能地为学困生提供更多的成功的机会，让学困生体验成功，体验成功的，例如教师备课时，要设计优等生回答的难问题，也要设计学困生回答的容易问题，使优等生有所收获，也要使学困生体会到成功和进步，若有些学困生还是把问题答错了，这是应加以引导，引导其纠正错误，切不可大加指责、批评，这样会逐步使学困生尝试到成功的甜头；还比如，在平时的考试中出题时应出些尽量简单些的数学题目，让学困生也能在考试中获得较高的成绩，以培养学习数学的兴趣，使他们意识到自己行，自己也能学好数学；考试结束后，教师应仔细分析学困生的试卷，不但要找错误所在，还要找答题时的闪光点，对简单的错题应要求他们要及时纠正，有些错题还得教师辅导，对闪光点有时还应赞扬，这样做的目的是，使学困生通过刻苦学习也有获得高分的机会，让他们有成就感，逐步改变他们的数学学习成绩真是比别人差一等的局面和印象，从而提高他们学习数学的兴趣和自信心，激励他们更加努力，以此达到彻底转化他们的目的。
2.2让学困生得法，提高他们的学习学效率。学困生的成因是多方面的，其中没有科学的学习方法也是一个主要原因。作为教师应根据不同的学困生的实际情况，对他们分别进行学法指导，指导学困生课前如何预习、课堂上如何听讲、如何思考、课后如何完成作业、如何复习等。
2.3保持自己较高的道德修养和提高自身业务水平，让学困生钦佩你、喜欢数学、喜欢数学学习。“才高为师、身正为范”，作为一名教师，不但要有高尚的道德修养，而且还需要较高的才学水平，只有这样，学困生才能从内心深处尊重自己，喜欢自己所教的科目，从而为学生学好自己所教的科目打下比较坚实的兴趣基础。正因为如此，作为教师，我们应不断钻研自己的业务，应不断提高自己的教学水平，应不断保持为人师表的良好形象，为学生起表率作用。
综上所述，是本人长期从教以来，对高中数学学困生的成因及如何转化的几点看法。当然，数学学困生的转化是有难度的，更不是纸上谈兵，我们转化高中数学学困生需要坚持、也还需要耐心，笔者终究相信“一分耕耘、一分收获”。
参考文献
[1]肖慧.浅谈高中数学学困生的成因及其转化[J].基础教育论坛,2012(10).
[2]申银燕.高中数学学困生的成因分析及转化对策[J].当代教育论坛,2006(24).
[3]孟祥.兰初中数学学困生成因分析及转化的几点做法[J].山东教育科研,2001(10).
记忆是思维之钥的储仓，没有记忆，思维就是断层的，记忆是智慧的母亲，没有记忆，学习就是失败的.化学知识点的繁多让许多原本喜爱化学的高中学生望而却步，甚至在高三几轮复习中，因为基础知识、基本规律的记忆的偏差和缺失而导致解题正确率、速率停滞不前，得分不高从而沮丧抑郁，对其他学科的复习产生消极影响.但如果学生可以掌握一些巧妙的记忆方法，将化学知识清晰地存储于脑海中，随时随地快捷地提取，压力山大的高中生涯将会轻松一点，胜人一筹.
常见可应用于高中化学知识体系中的记忆术有：
一、关键词记忆法
关键词是透过现象看本质的钥匙，是对广泛的文字信息的综摄.通过对关键词的分析，将已有的具体信息进行重新构思，产生更多的新的构思，由此发现和掌握问题的实质.一些枯燥的化学理论、规律同一幅幅由关键词串起的画面联系起来是记住它们的好办法.首先，要能够回忆起理论、规律中的关键词，其次要记住这些理论、规律的适用范围，全面考虑有无特例.
比如，电离能和电负性周期性变化的规律：同一周期，从左到右，第一电离能呈变大的趋势，但价电子为ns2和ns2np1的元素相比较，由于第ⅢA族的元素原子p轨道上有1个成单电子，不稳定，比第ⅡA族的相邻元素更容易失去一个电子，故同周期ⅡA族的元素的第一电离能大于ⅢA族的元素第一电离能.与此类似的还有第ⅤA、ⅥA族的元素，第ⅤA的元素p轨道处于半充满状态（ns2np3），属于稳定结构，第一电离能数值大于相邻的第ⅥA族的元素；而电负性，描述的是不同元素的原子对键合电子的吸引力的大小，同一周期，从左到右，电负性逐渐变大.该规律圈出关键词后可简化为“三字经”言：电离能，看充满，左到右，趋变大，有特例，或二三，或五六；电负性，比引力，左到右，渐变大.
利用关键词进行记忆不仅能够加深对化学知识的理解，还能够将这种提取关键词的能力应用在对化学问题的具体分析过程中，同时提高自身解决问题的能力.
二、联想记忆法
联想指由于某人或某事物而想起其他相关的人或事物，是将你想要记住的东西和已知的东西之间形成智力联系的过程，它能够帮助我们在具有某种共性或者共同点的人、物体、图像等之间建立联系.在高中化学知识体系中，我们习惯于将化学物质联想为枝繁叶茂的大树，每一次分类就是每一处由小到大、由表及里、由现象到本质的系统构造；我们将纷繁复杂的化学反应联想为形态各异的大厦建造，每一种生成物的出现都是微粒样砖瓦的重塑，演绎着决定和被决定的因果逻辑.对于抽象的化学基本概念的记忆，此法较为有用.
例如，记忆氧化还原反应中关于还原剂和氧化剂的概念，到底还原剂失电子化合价升高，还是氧化剂失电子化合价升高，常有学生混淆，此时介绍联想记忆法，会使概念清晰化，易于辨析.我们尝试将氧化还原的过程联想成一次好朋友之间赠与和接受电子的过程，初中熟悉的氧化剂是氧气，那么我们就将氧化剂联想成氧气，氧气的化合价为零，只能降低成负价，这是氧气接受了别的物质的电子造成的，下次它就要将电子再“还给”其它物质，所以生成物叫“还原产物”，这一过程氧气被还原，发生还原反应，而还原剂作为赠予电子的那一方，也就是把电子还出的那一方，化合价因为电子的离开而升高，下次它就轮到“像氧气那样接受电子”，所以产物叫“氧化产物”，这个[JP3]给出电子的过程就是还原剂被氧化的过程，还原剂发生氧化反应.[JP]
三、路线记忆法
路线记忆法是将联系、位置和想象结合在一起的一种强大、完整的记忆技巧.首先选择一个比较熟悉的地点，比如你的家、学校、或者公园，用这个地点构思一小段旅行的路线，包含你最为印象深刻的地方，比作站点，每次运用这条线路时只要清空原有路线上的站点的内容，重新储存要记住的新信息；然后按照记忆内容的顺序安排站点的顺序，用这些站点储存要记住的东西，站点的选择最好与记忆的内容有关；接着是记忆这条线路，一边闭上眼睛想象自己在旅行，沿途是自己熟悉的风景事物，一边数着每个经过的站点，直至终点站；最后是记忆内容，可以配合使用许多手段，比如夸张、色彩、动作、味道等等.
熟练掌握氧化还原反应中离子得失能力顺序是我们熟练解决氧化还原相关题目的依仗，阳离子得电子顺序与金属活动性顺序相反，比较容易记忆和使用，但是阴离子等的失电子顺序（S2->I->Fe2+>Br->Cl->OH-）较难记忆，我们可以尝试使用位置记忆术.假设我们学生高中学习期间常往来的地点有宿舍、食堂、操场、教室，高中学习压力大，大多数学生缺乏睡眠，希望留（硫S2-）在宿舍，更聪明一点得去食堂补碘（I-）这个智慧元素，途经操场大门上栏杆上都可以看到铁（Fe2+）锈（溴Br-）斑斑，绿（氯Cl-）草茵茵的操场.
四、谐音记忆法
利用汉字中同音或近音的条件，用同音或近音的字来代替本字，产生辞趣.轻松诙谐地句子、故事总使人心情愉悦，短时间里加强有意注意，大小之余，印象深刻.高中生正处于好奇心旺盛的时期，对有趣的事物充满求知欲，并且勇于模仿和超越.合理利用谐音记忆，不仅可激发学生学习化学知识的热情，同时可以在其他学科的学习中、在今后的学习中，融会贯通，继承和发扬祖国文化瑰宝.
高一上学期期末考试已经结束了，高一年级学生就要面临高二的文理分科。高一寒假学习计划对自身做个清晰、理性的分析，确定自身优势，为学文、学理寻找理由就显得颇为重要。大概方向确定后，就要明确自己所选择的方向中，哪些学科要参加高考，哪些只需通过会考，从现在起就可以相应地制定出针对不同科目的不同 “用力”方法，将自己高中的时间、精力做到合理分配。
依常规来看，多数学生会选择学理——未来的升学、就业面相对更宽。学习理科，数、理、化就全部是考试科目，而数理化的难点都在高一。因此，高一寒假必须做的就是把上学期没有学会的内容学明白。有一些知识的掌握是为了以后更好应对相关知识点，如果高一就出现漏洞，未来所有相关知识也都会关联出现问题。
值得注意的是，高一的学习量很重，很多学生往往在第一学期还不太会调控。因此，高一学生第一学期的功课或多或少都会有落下的地方，这就需要利用寒假进行调整、提高、填补工作，甚至可以说，寒假能否利用好，对未来三年的状态会产生重要的影响。
高一寒假学习计划时间安排：
7：00 起床
7：20 洗涑完毕之后跑步：绕楼2楼(7：20----8：00)
8：05 吃饭
8：20---8：50 背单词
8：55---9：25 背课文
9：35---10：35 数学
10：45---11：45 英语
11：45---12：00 课外书
12：00---13：00 午休
13：10---14：10 化学
14：20---15：10 物理
15：20—16：20 语文
16：20---吃晚饭前 free
关键词：多媒体技术；高职高专医用化学；应用分析
引言
本着高职高中专医用化学的教学质量提高的目的,在多数实体课堂引入多媒体技术显得尤为重要,而类似Flash这样的传统计算机多媒体技术的应用更为医用化学的课堂教学增色不少。
1 医用化学的教学特点及现状
传统的医用教育化学的课程一般课程设置为一学年，而从授课形式以及授课效果来看普遍学生的课堂积极性较差，大部分源于课堂教学形式呆板，学生只能靠死记硬背等形式来记住一些传统的知识点，这样无疑给教学质量大打折扣。另外医用教学的内容更新又十分迅猛，教师假如不能做到与时俱进，那无疑就会对给课堂的教学带来诸多不便。诸如此类的现状是制约目前医用化学发展的关键所在，因此引入多媒体技术来丰富完善课堂教学显得尤为重要。
1.1 医用化学的教学特点
由于医用化学的教学中往往需要大量的教学资源来辅助授课，因此像标本、挂图以及录像等传统的辅助手段缺一不可。但是由于实体教学的局限性，学生无法在第一时间了解到最直观的知识点，所以传统医用化学的教学特点就是分散性与非直观性，其次就是大面积的重复知识点需要大量的PPT演示来将平面的知识点生动化与立体化，但是往往在没有多媒体教学的引入之前，传统的教学太过于单一化与平面化，这样学生往往只能被动式的接收信息，所以医用化学的传统教学特点第二就是单一化与机械化。
1.2 医用传统教学的局限性
医用传统教学的最大局限性与缺陷在于以下三个方面：一、教学内容单一，由于以单一的医学化学如一些药物化学反应式、酶连反应还有人体结构示意图等比较枯燥的内容只是以挂图或者黑板抄的形式来展示，无非是单一而且枯燥。其次第二点是教学手段单一，虽然课堂的标准化程度得到了一定程度的提高，但是课堂的知识传授依然以教授传授为主，而且多数停留在信息的单向传输阶段。第三点是教学质量并不稳定。由于传统的医用教学知识点众多，尽管有了相应的挂图以及人工标记的指示，但是教学效果仍然高度依赖教师质量，从而导致教学品质无法稳定的进行下去。
2 多媒体技术在教学中的实践与分析
由于医学课程相对来说比较枯燥且死板，学生的学习兴趣一时难以激发。而假如将多媒体技术应用于医学教学中，会对教学结构与体系乃至教学思想的改革都起到了促进和推动的作用。
2.1 多媒体技术引入的利与弊
首先，多媒体技术能够极大的增强学生的学习动力，首先其立体的功能可以展现一些化学物质的宏观和微观结构。并且当一些学校并不具备完善的实验条件时，应用多媒体技术来演示化学反应进程可以使学生感到生动、形象有趣，可以提高学生的记忆力合学习能力。还有一点就是多媒体技术能够提高学生的自学能力和动手能力。因为传统的教学任务主要是向学生灌输知识，这样往往不利于学生终身学习的需求。而通过应用多媒体技术的交互租用则可使学生与计算机进行信息交流对话，大大增强了学生掌握知识与技能的能力，并且培养了学生观察能力以及缜密的思考能力。但是凡事都存在这对立面，而多媒体的引入同样也会给医用教学带来弊端。比如对于病理学这门课程考试而言，多媒体技术的引入就存在这以下方面的不足。首先内容的真实性尚有欠缺，由于制作幻灯片进行考试的画面都是平面图像，这样的层次感比较差不如事物来得真实。
2.2 拓宽多媒体应用渠道的必要性
由于社会发展以及教育改革的必要性，传统的教学以及无法适应如今的课堂教学，因此在医用化学教学中引入多媒体渠道是教育改革的趋势与要求。而且，从近几年来看，一些教研人员也在深化课堂教学改革以及优化教学结构上做出了很多有益的探索，并且总结了大量值得推广的经验。这是拓宽多媒体应用渠道的必要性一。还有另外的一个必要性是教改革上的要求。因为教师需要吸收大量丰富的材料来展示给学生，而多媒体技术就可以提供这样的平台，从而可以达到预期的效果，并且也能把精心选择的材料传递给学生，从而增强课堂教学的实效性。
3 开发多媒体医用化学教学软件的重要性
3.1 Flas软件图片的重要性
由于医用化学中的化学符号众多包括大量的化学结构式以及化学实验中用到的各种仪器比如烧杯到分析天平再到高效液相色谱，分光光度计等。而传统的教学根本无法将这些学习内容很形象地展示给学生。假如通过在PPT或者一些幻灯片上引入Flas软件，并且能够通过数码相机将实验所记录的真实图片采集下来，并通过技术处理后导入多媒体教学软件中。
3.2 ChemOffice在医用有机化学教学中的重要性
因为医用化学的教学涉及到很多后续的课程包括生物化学、药理学还有医用生物学、临床医学等多方面，为了使学生能在有限的课堂时间内汲取更多的基础理论知识，多媒体技术的应用显得尤为必要。而随着计算机技术的发展与深入，假如能开发多种化学软件，并将其与多媒体技术有机的结合为一体，那将进一步地提高整个课程的教学质量和教学效果。例如剑桥软件公司开发的一款软件ChemOffice就是基础地介绍了医用有机化学的基础的一面，其功能如下：（1）、可以显示有机化合物的三维立体结构，便于学生从空间上理解复杂的有机分子结构，在有机化学的教学中，往往糖类的分子结构让大多数学生挺头疼的，例如糖的开链结构是如何转变成哈沃斯结构的，该软件就清晰地展示了比如a-葡萄糖的三维立体结构，便于学生理解单糖是如何从开链结构转变为环状结构。（2）、可以计算分子的电荷分布，在学习苯环的取代基的定位效应时候，比如当取代基为卤素的时候，为邻对位效应，但又是钝化集团，教材上的一些一些理论可能不太明确，但是假如借助ChemOffice 软件分子的电荷分布来说明，通过该软件的精确计算，假如苯环上的电子云密度降低，说明卤素为钝化基团；同时邻位与对位的电子云密度相对比较高，说明卤素有较高的邻、对位效应。
3.3 多媒体教学中加入动画软件的重要性
类似于Photoshop这样的动画编程软件在医用化学的教学中显得必不可少哦，因为其通常可以将对象的大小、颜色以及构型进行相应的彩编，然后有助于帮助学生理解课堂教学中的一些抽象化的化学问题，并且当讲解物质结构时候，关于原子的电子层以及能级等比较抽象的问题时候，假如能够制作成多媒体动画形式并加以演示，那无疑会加深了学生对整个系统的理解。
4 结语
多媒体技术在高职高专医用化学教学中的应用具有深远的意义，首先有助于教师随时收集教学反馈信息，以及学生发现自己学习的不足，并且更重要的是也能有助于学生理解相应的化学软件教程，达到计算机软件与多媒体技术有机的结合为一体。（雅安职业技术学院医学系；四川；雅安；625000）
参考文献：
［1］ 肖 信,袁中直.Internet 上的有机化学软件［J］.有机化学.2002.20(3):263-268
［2］ 陈宇飞等.现代多媒体技术在植物保护教学中的应用［J］.东北农业大学学报.2008
［3］ 高付东.中学化学计算机辅助教学的研究［J］.曲阜师范大学学报.2004
关键词： 信息技术；化学；实验；情境；直观性；互动
目前，以现代教育理论和方法为基础，以系统论的观点为指导，以信息技术为核心的现代教育技术的运用，已成为我国面向21世纪基础教育教学改革的新视点，信息技术与课堂教学有机统一的研究也因此成为教学科研的重点。在建构主义理论指导下，信息技术为高中化学教学提供了良好的学习环境，使学生的主体地位得以真正确立，使自主学习、探索学习、协作学习得以真正实现，使终身教育和学习社会化成为可能，极大地激发了学生的学习动机，培养了创新精神和实践能力。信息技术与高中化学课程的整合不能停留在工具层面上，应深入探究教学设计、教学策略，以形成教学模式，应结合教学理论和实践，以推进化学教学的彻底变革。
一、利用信息技术有利于优化实验教学
以实验为基础是化学学科的重要特征之一。教师的演示实验和学生的分组实验在教学中扮演相当重要的角色。遗憾的是在实际教学中，很多实验不能现场操作。这样不但会使某些教学内容抽象、枯燥、说服力不强，而且还造成学生难以理解，达不到较好的课堂效果。此时，如果恰当地将信息技术运用到课堂教学之中，会弥补这一缺憾，收到意想不到的效果，从而顺利实现教学目的。如，在教学中如果遇到带有危险性的实验，污染严重的实验和现象不太明显的实验，我们可以充分利用教材中的插图、图解、文字等内容，用计算机将其进行重新编辑，同时加入动画和声音。这样，学生的兴趣就可以大大提高了。又如，在讲化学实验中的一些错误操作时，如果只靠老师讲其错误的原因以及可能带来的危害，常常会使学生半信半疑。这时我用计算机模拟这些错误操作并通过放慢动作将其步骤分解。例如，稀释浓硫酸时将水倒入浓硫酸中，液体沸腾飞溅；给固体加热制备气体时，试管口向上倾斜，加热产生的水倒流至试管底部造成试管破裂；当加热液体超过三分之一的试管且试管口朝着人时，液体冲出管外且灼伤人等都可用动画来完成。学生看到错误操作的危害性，印象深刻并加深了对错误原因的理解。在这样的课堂上，学生兴趣十足，自然愿意参与进来，从而成为课堂的主人。
二、利用信息技术有利于创设问题情境
信息技术能够向学生提供多种信息处理能力和多种刺激的信息，如语言、文字、图像、动画、声音等。学生可以通过多种感官获取丰富的信息，有利于学生的记忆力和想象力的提高，对学生的吸引力也很大。因此，信息技术具有其它教学手段所不可比拟的优势。如，化学某些科普性的视频，某些化工生产流程、环境污染的介绍、各种矿产资源、海洋资源的介绍的视频。通过这些视频的展示既可以使化学教学理论联系实际生产、开拓学生视野，又可以增加学生学习化学的兴趣。例如，在“化学平衡”这节课时，我采用三维动画模拟制作氮分子、氢分子、氨分子达平衡的动画过程，通过画面动静结合的形式，直观形象地分析了化学平衡的动、定、变三大特征，通过使学生看到化学键的断裂和重新组合的过程使较为抽象的概念容易让学生理解，便于记忆。总之，信息技术形象生动，感染力强，能激发学生对学习的兴趣，从而活跃课堂气氛，使学生在兴趣盎然的情境下去接受知识，兴高采烈地参与课堂，巩固了知识。
三、利用信息技术有利于化学直观性教学
化学是研究物质的组成、结构、性质以及变化规律的基础自然科学。利用信息技术对实验现象进行放大，可以克服演示实验可见度小的缺陷，使学生能清楚地观察到实验现象。如《铁的性质》一节 Mg、Zn、Fe、Cu 与 HCl 是否反应及反应速度的对比实验，在实验时将仪器放在实物展示台上，用液晶投影机投影到大屏幕上，根据是否产生气泡、反应的剧烈程度等现象，推断金属的活动性顺序，这样做把俯视观察变为平视观察，让坐在后面的学生对实验中产生的细微现象仍然看得非常清晰，增强了实验的可视性及真实可信性。教师充分利用投影手段克服实验器材的局限，辅助教学，引导学生仔细观察、感知，自觉地进行表象活动，提高演示效果。又如，在探究电解一些电解质溶液的电解产物及溶液的 PH 值变化时，我利用 flash 软件设计了一个课件，用一些小球来模拟溶液中看不见的阴阳离子，然后让学生分别对电解氯化钠溶液，氢氧化钠溶液，硫酸铜溶液和硫酸溶液进行模拟分析过程，探究出电源的阴极和阳极产物的规律和溶液的 PH 值变化规律。通过这种方法，使学生对理论知识的学习不再觉得困难，相反却产生了很大的兴趣，非常愿意去尝试学习。真的是变被动为主动了。
四、利用信息技术有利于实现互动性教学
【关键词】 nf-κb；核糖核酸类，反义；肌细胞，平滑肌
effect of antisense rna of nf-κb on proliferation of vascular smooth muscle cells in spontaneously hypertensive rats/hu rong，hong huashan，xu changsheng，wu kegui//chinese journal of cardiovascular rehabilitation medicine,2009,18(2):116
abstract：objective:to investigate the effect of antisense rna of nf-κb on proliferation of vascular smooth muscle cells（vsmcs） in spontaneously hypertensive rats（shr） promoted by thrombin.methods:after pretreated with the 50moi recombinant adenovirus expressing antisense rna of nf-κb for 48h and 100μmol/l pdtc （nf-κb special inhibitor）for 1h， vsmcs proliferation induced by 0.5u/ml thrombin was investigated.the proliferation rate of vsmcs was determined with both wst-1 metabolic activity and 3h-tdr incorporation efficiency.results:the pretreatment of recombinant adenovirus expressing nf-κ b antisense rna obviously inhibit vsmcs proliferation induced by thrombin (p<0.01) at the rate of >30%, which was similar to the inhibition of vsmcs proliferation by nf- κ b special inhibitor pdtc with no statistical difference between two group(p>0.05).conclusion:the recombinant adenovirus expressing nf-κ b antisense rna may effectively inhibit vsmcs proliferation induced by thrombin,is similar to the nf- κb special inhibitor,may be applied to successive basic research and clinical interference treatment.
author′s address：department of cardiology，union hospital，fujian medical university，fuzhou，fujian，350001,china
key words：nf-kappa b;ribonueleases,antisense; myocytes,smooth muscle
血管平滑肌细胞（vsmcs）的增殖、向内膜下迁移、分泌细胞外基质等在血管增殖性疾病的发病中起重要作用。体内可以引起细胞增殖的因素很多，各种有丝分裂原可通过不同的信号传导系统产生细胞增殖反应，单纯抑制某种特定的因子并不能完全抑制病灶形成。因此，阻断调节细胞增殖、分化、迁移等最终共同通路的关键基因成为有效防止血管增殖性疾病的研究方向。核因子-κb（nf-κb）是调节细胞基因转录的关键因子之一，调控几十种生长因子、细胞因子、粘附因子、趋化因子等靶基因的表达[1]。因此，许多学者认为调控nf-κb的活性是一个理想的治疗靶点。基因治疗是从基因水平改变细胞的病理状态而达到治愈疾病的目的，具有一次治疗长期有效的优点，克服现有药物疗法的缺点，实现“生理性治疗”[2]。反义rna是一类能与特异性mrna互补的小分子质量的、可扩散的dna转录物，它能够从翻译水平、转录水平和核酸复制水平上高度特异性地抑制靶基因表达。反义核酸技术的意义在于仅干扰靶基因功能，对基因组其它基因的结构无影响，而且方法简便。本研究试图在细胞水平探讨以腺病毒为载体，nf-κb反义核酸治疗对vsmc增殖的影响，为其在整体动物的水平治疗经皮冠状动脉介入治疗（pci）术后再狭窄和动脉粥样硬化（as）奠定基础。
1 资料与方法
1.1 一般资料
实验所用的自发性高血压大鼠（shr）购自北京维通利华有限公司［二级动物合格证号：scxk(京)2003-0003］。表达nf-κb反义rna重组腺病毒载体－pad/cmv/269和空载体pad/cmv系本实验室构建保存[3]；凝血酶、吡咯烷二硫氨基甲酸盐（pdtc）（sigma公司）1；氚-胸腺嘧啶核苷（3h-tdr，中国原子能科学研究院）；测定细胞活性的wst-1试剂盒（德国boehringer mannheim公司）；阳离子脂质体（lipofectamine）tm 2000转染试剂（invitrogen公司）。
1.2 实验方法
1.2.1 vsmcs的培养与鉴定[4]:以组织贴块法培养vsmcs。取清洁级三月龄雄性shr大鼠，无菌操作分离其胸主动脉，剪碎后加入含15%胎牛血清（fbs）的dmem培养液（含100 ku/l青霉素，100mg/l链霉素），5%co2、37℃二氧化碳培养箱静置培养。实验选用3～5代细胞。用光镜和免疫细胞化学法鉴定。
1.2.2 重组腺病毒的制备、滴度测定及鉴定[3]:paci酶切使重组腺病毒质粒pad/cmv/269线性化，紫外分光光度计测定质粒的纯度及浓度。按lipofectaminetm 2000转染试剂盒操作说明，用脂质法转染培养好的293单层细胞，进行细胞内包装，形成并释放完整的腺病毒颗粒。包装后的腺病毒用空斑法测定滴度，操作按virapowertm adenoviral expression system 试剂盒说明书。重组腺病毒用聚合酶链式反应（pcr）方法进行验证，按dna提取试剂盒操作说明。
1.2.3 实验分组:实验选用3-5代的培养vsmcs，用0.125％胰酶消化后，以2×104个/孔或5×103个/孔，均匀接种于24孔或96孔培养板上，待细胞贴壁生长至70%～80％汇合时，吸弃原培养液，换用无血清或0.2％血清的dmem培养液，继续培养24h，使vsmcs处于g0/g1期，再进行后续干预实验。将培养细胞分为5组：①空白对照组：加入无血清dmem液；②空载体组：加入50多重感染（moi） ad/cmv感染vsmcs；③凝血酶组：加入终浓度为0.5u/ml凝血酶；④pdtc组：先加入终浓度为100μmol/l的pdtc预处理1h，再加入终浓度为0.5u/ml凝血酶；⑤反义rna预处理组：先加入50moi 重组ad/cmv/269感染vsmcs后48h，再加入终浓度为0.5u/ml凝血酶。按实验要求细胞继续培养至加刺激因素凝血酶后24h，测定细胞增殖率。每组复3孔取均值。重复4次。
1.2.4 vsmcs增殖的测定方法:wst-1代谢活性测定[4]：取3～5代vsmcs以5×103个/孔均匀接种于96孔培养板上，培养至70%～80％汇合时，换用0.2％血清的dmem培养液，继续培养24h，使vsmcs处于g0/g1期。在上述各干预因素刺激至规定时间后加入即用型wst-1溶液，10μl/孔，继续置37℃ 5％co2培养箱孵育90 min。取出培养板，置振荡器上充分振荡（300 r/min）1min，在酶标仪450/630nm双波长处检测光密度（od）值，即wst-1检测值。每次实验均设一个（复3孔）空白对照孔（以dmem培养液代替细胞），对照孔吸光值应<0.01。dna合成率测定：3～5代vsmcs以2×104个/孔，均匀接种于24孔培养板上，在上述干预因素加入时，同时加入1微居里/ml的3h-tdr，共育至相应时间后，吸弃培养液，0.125％胰酶消化细胞，收集细胞于0.45μm的微孔滤膜（预先用10％三氯醋酸湿润）上，负压抽滤，用生理盐水和10％三氯醋酸冲洗滤膜，室温凉干后置入液体闪烁杯中，加入3ml闪烁液［二甲苯+0.5%二苯基噁唑（ppo）+0.04%对苯撑苯唑基（popop）］，静置过夜后，在液体闪烁计数器上进行放射性强度的测定。
1.3 统计学处理
实验结果用数据和图表表示，测定值以均数±标准差(±s)。采用spss 10.0统计软件包分析。组间比较采用多样本均数的单因素方差分析检验。p<0.05为差异有显著性。
2 结 果
2.1 nf-κb反义rna重组腺病毒感染vsmcs对vsmc wst-1代谢活性的影响
凝血酶＋反义rna组和凝血酶＋pdtc组的wst-1的od值均比凝血酶组明显减少（p<0.01），反义rna组与pdtc组之间不存在显著差异（p>0.05）。50moi nf-κb反义rna和100μmol/l pdtc对0.5u/ml凝血酶诱导的vsmc wst-1代谢活性增加的抑制率分别为35.64％和36.32％，较之凝血酶组显著减少（p<0.01），见表1，图1。
2.2 nf-κb反义rna重组腺病毒感染vsmcs对vsmc 3h-tdr掺入率的影响
凝血酶＋反义rna组和凝血酶＋pdtc组的3h-tdr掺入率均比凝血酶组明显减少（p<0.01），反义rna组与dptc组之间不存在显著差异（p>0.05）。50moi nf-κb反义rna和100μmol/l pdtc对0.5u/ml凝血酶诱导vsmc 3h-tdr掺入率增加的抑制率分别为45.22％和49.62％，较之凝血酶组显著减少（p<0.01），见表1，图2。表1 不同组wst-1测定的代谢活性和氚胸腺嘧啶核苷（3h-tdr）掺入率(n=4)
3 讨 论
许多能够抑制vsmc增殖的药物，无论是在基础研究还是临床实验中，均已被证明具有防治动脉硬化及pci术后再狭窄的作用。但由于药物治疗的效果尚不十分理想，以及必须坚持长期用药给病人心理上造成了巨大的困扰，寻找更加有效和方便可靠的治疗方法便成为心血管病研究的热点。尽管基因治疗目前尚不十分成熟，但在这一领域中所取得的成就已引起众多学者的关注。
凝血酶是一种重要的血管活性物质，除凝血作用外，晚近也证明它还能促进vsmc的增殖和迁移；促进血管壁非细胞成分的累积和新生内膜形成和释放炎症反应因子等作用，其功能多由细胞表面的凝血酶受体基因介导[5]。nf-κb是调节细胞基因转录的关键因子之一，新近研究发现vsmc中存在着nf-κb通路，且是vsmc增殖必经的激活通路。本系列实验的先前研究结果显示凝血酶能够激活vsmc的nf-κb，使其从细胞浆转位至细胞核，而且凝血酶引起的vsmc增殖与nf-κb途径相关联[6]。nf-κb可能是vsmc增殖的细胞内信号转导的共同通路。国内、外已有利用反义核酸技术抑制凝血酶受体表达来阻断凝血酶作用，从而抑制vsmc增殖的报道[7～9]，但利用反义表达载体、反义核酸技术抑制nf-κb的生成，从而达到抑制凝血酶诱导vsmc增殖的目的至今尚未见相关报道。
本研究利用前文[3]构建的nf-κb反义rna腺病毒表达载体，转染293细胞，获得高滴度腺病毒上清，再感染vsmc，观察nf-κb反义rna对凝血酶引起的细胞增殖的作用。结果显示，该载体能在vsmc内表达出nf-κb反义rna，显著抑制了凝血酶诱导的vsmc增殖，显示出该反义表达载体在心血管细胞增殖性疾病的基因治疗的研究中具有良好的适用性。
基因治疗是从根本上针对发病环节的一种治疗手段，靶向性更明显，具有一次治疗长期有效的优点。本实验结果证实，在同等条件下，nf-κb反义rna对vsmc增殖的抑制率＞30％，即具有生物学效应，且与nf-κb特异性阻断剂pdtc的抑制作用相仿，为今后进一步的基础研究和临床干预治疗奠定了基础。值得注意的是，nf-κb在维持机体的防御功能和细胞生死平衡方面，起着极其重要的作用，完全地、持续地阻断nf-κb激活有可能导致免疫缺陷和正常细胞的凋亡[10,11]。因此，如何进一步提高反义核酸技术的稳定性、有效性、安全性，尚待进一步的研究。
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[论文摘要]文章基于高职艺术设计类人才培养特点，以南宁职业技术学院“企业+责任班”模式构建与实践为例，探讨了在产业经济转移背景下，实现高职艺术设计类人才规模化培养工学结合模式。
[论文关键词]高职艺术设计 规模化 人才培养 工学结合 企业+责任班
一、问题的提出
近几年，沿海一线城市营运成本大幅增加，一批企业从沿海迁往内地，产业转移趋势已形成。内地的装饰与环境景观设计、新媒体设计、艺术设计类等技术服务产业，受到产业转移影响，迎来了新的机遇与挑战：(1)随着产业转移，内地艺术设计类等技术服务市场活跃；(2)外地企业带来先进专业技术、规范的管理理念，促使内地市场专业细分明显、市场竞争加剧；(3)基于艺术设计类技术服务特点，外地企业需要大量本地技能人才；同时，本地企业受产业转移冲击，对人才规格要求发生变化。
就目前我国就业形势来看，高等职业人才培养规模化已是大势所趋。而传统艺术设计类专业人才多是小班培养，办学规模与质量的矛盾一直是困扰高职院校的瓶颈。如何乘产业转移东风，整合校企资源，探索一条具有专业和地方特色工学结合路子，实现高职艺术设计类人才规模化华丽转身，是摆在高职教育者面前迫在眉睫的问题。本文拟以南宁职业技术学院艺术设计类人才培养建设为例，探讨全方位工学结合的高职艺术设计类规模化人才培养模式研究与实践，与相关人士商榷。
二、国内外高职人才培养工学结合模式研究与实践对比分析
1 基于工学结合的人才培养模式研究与实践是目前高职教育的重点、难点。目前，进一步深化高职教育改革，加强工学结合、校企合作是高职教育的关键点。在高职中，工学结合人才培养模式主要有以下几种：(1)“订单培养”或“订单教育”。其基本内涵是由用人单位提出人才需求标准，校企双方共同论证确定培养目标、课程设置、教学计划、教学大纲和教学进度，完成人才培养的任务。例如“丰田班”“富士通”班等培养形式。(2)阶段性“工学结合”培养模式。其基本内涵是学生在课堂学习基本专业知识理论，然后通过课程实训、顶岗实训，学生走出校园，进入职业岗位实训。当前高职中文、管理等各类专业广泛应用该培养模式，例如“2+1”“2.5+0.5”等培养形式。
其中，“订单”式合作培养，学校基本照搬企业培训计划，企业将培训中心移植到学校，校企共建，工学结合融合性较好。基于职业岗位特性，当前应用于汽车维修、机电一体化等劳动密集型、机械生产流线化的职业岗位人才培养，不具有普遍适用性；阶段性“工学结合”培养模式，职业岗位应用面向广泛，但该模式中，校内外教师、工和学相对脱离，校内教师对市场前沿信息把握有相当难度，理论和实训的融合性不高。
2 国内外工学结合人才培养模式研究与实践对比分析。发达国家职业教育中人才培养模式有以职业技能培训为主体的模式，例如德国的“双元制”、澳大利亚的“新学徒制”、法国“学徒培训中心”；还有以职业素质培养为主体的模式，例如新加坡的“教学工厂”、日本的“企业教育”、丹麦的“模拟公司”等。
与发达国家相比，我国高职教育人才培养存在以下不足：(1)我国工学结合人才培养模式支持系统的要素短缺——缺少管理体制、人员结构、教学制度、课程体系等方面的支撑；(2)政府缺乏对企业的激励机制，用人单位合作的积极性不高成为模式实施的一大障碍；(3)政府没有鼓励学校实施工学结合人才培养模式的专项经费。因此，我国学校实施工学结合人才培养模式往往处于完成任务和勉为其难的被动地位。
三、高职艺术设计类规模化人才培养工学结合模式探讨
1 基于工学结合的高职艺术设计类规模化人才培养需要解决的关键问题。结合上节分析，在我国现有国情下，高职艺术设计类规模化人才培养需要解决以下问题：(1)校企合作、工学结合方面，需要整合利用产业转移资源，寻找校企合作最佳点，服务地方经济；(2)校方办学方面，需要突破艺术设计类专业小班培养定式，解决办学规模、办学实训和师资基础条件与教学质量之间的矛盾。
2 “企业+责任班”人才培养工学结合模式构建。第一，“企业+责任班”人才培养工学结合模式基本思路。学校设立由行业专家、专业带头人等组成的专业建设指导委员会，并由专业建设指导委员会选择生产技术先进、管理严格、经营规范、社会声誉好，尤其在某一方面的专业技术具有专业核心竞争力的企业合作，根据企业需要技能人才的特点，找准双方利益共同点，成立教学责任班。责任班以合作企业的特长专业技术为职业技能的培养重点，以企业实际项目为依托建立合作工作室，由责任班专业教师组织，企业骨干和专家共同建立课程体系、确定课程各阶段实训环节、制定评价标准等，以实现“多方位、全过程”工学结合人才培养模式。
第二，“企业+责任班”人才培养模式构建。以南宁职业技术学院艺术工程学院为例，经过多年的高职教育发展，艺术工程学院在近年来国家示范院校建设、精品课程、教学团队、国家名师等方面建设均取得了较好成绩，由此，带了专业品牌效应，教学改革上教改、科研、社会服务的成效凸显，办学形式类型多样，艺术设计类专业招生逐年递增。以国家精品专业室内设计技术专业为例，该专业从2008级开始增加到10个班。而办学规模的扩大，带来了实训设施、师资等教学条件方面较大压力。 转贴于
鉴于上述情形，南宁职业技术学院室内设计技术专业教学团队与广州、香港及本地装饰龙头企业合作建立“企业+责任班”，根据各企业特质，一个企业引领一个专业拓展方向，把室内设计技术专业方向细化为设计、施工图、家居饰品、施工等方向，共同建立课程体系、确定课程各阶段实训环节、制定课程与专业评价标准等。室内设计技术专业教学团队与各合作企业研讨确定出一个平台、多个方向课程体系，即一年级为专业方向相通基础平台课程和由合作企业指导下专业方向认知实训；二、三年级依托不同方向的“企业+责任班”载体，既可以“企业进校园”，也可以“学生出校园”。学生采取灵活多样的学习形式，以室内设计技术专业岗位培养要求为目标，引入行业、企业岗位标准，以企业实际工程项目为依托，校企共同开发课程，构建教学课程体系。“企业+责任班”，以班级为单位，引进企业管理理念与机制，对学生教学过程组织管理、教学质量监控；引进企业评估标准，建立学生培养评估体系，形成学生自主管理。
3 企业+责任班”人才培养模式分析。第一，“企业+责任班”模式实施的前提。应该说，在中国现有国情下，由于政府缺乏对企业的激励机制，企业只是经营的实体，学校才是人才培养的主体，高职院校只有增强人才培养主体意识，主动融入企业发展的产业价值链中，才能寻求到校企的利益合作点。所以，“企业+责任班”模式的实施是以学校增强人才培养主体意识为前提的。
第二，“企业+责任班”模式实现全方位工学结合分析。“企业+责任班”模式，根据某主体岗位专业群，优选在专业细分下具有某项核心竞争力的企业合作，企业在人才培养中主要起到职业技能和岗位能力培养作用。合作企业可以是时段性的，可以是一家或多家。这种模式中，学校是主动适应人才市场需求的主体，主动整合校企资源，依托企业引入项目，责任教师等校内教学团队培养企业要求人才，为企业提供人才服务，校企是利益的共同体。所以，共享校企资源，解决办学规模与办学条件瓶颈问题，全方位工学结合提升人才培养质量是顺理成章的结果。
[关键词]MMP_2；MMP_9；TIMP_1；血管平滑肌细胞；增殖；迁移；阿齐沙坦
中图分类号：R544.1文献标识码：A文章编号：1009_816X（2014）04_0274_04
[Abstract] Objective To investigate the effects of azilsartan on TGF_β_induced spontaneously hypertensive vascular smooth muscle cells （VSMCs） proliferation and migration. Methods Rat VSMCs were cultivated by the method of tissue explants adherence. Cells of generation 3 to 5 were used as the experimental system. The MTT test was used to measure cell proliferation and Boyden chamber assay was used to measure cell migration. Primary cultured VSMCs were treated by 10 ng/ml TGF_β and azilsartan for 24 hours. The expression of MMP_2， MMP_9， TIMP_1 were measured by Western blot and RT_PCR. Results The expression of MMP_2， MMP_9 and TIMP_1 in rat VSMCs stimulated by TGF_β increased significantly. VSMCs migration and proliferation also increased significantly. Azilsartan significantly inhibited TGF_β induced MMP_2， MMP_9 and TIMP_1 production in rat VSMCs， as well as VSMCs proliferation and migration. Conclusions Azilsartan inhibited TGF_β_induced VSMCs proliferation and migration by down_regulation the expression of MMP_2， MMP_9， TIMP_1.
[Key words] MMP_2； MMP_9； TIMP_1； Vascular smooth muscle cells ；Proliferation； Migration； Azilsartan
自发性高血压是最常见的心血管疾病，以体循环动脉压升高为主要特点。高血压伴发的血管重构包括血管壁腔比增加、小动脉稀少及血管功能异常。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）是参与降解全身各种组织细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的蛋白酶家族，参与正常和病理条件下的组织重构，金属蛋白酶组织抑制物（TIMP）是MMPs的特异性抑制物[1]。MMPs/TIMP的动态改变，造成选择性的降解ECM，从而调整血管内皮细胞形态、生长和成活[2]。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂可能是通过抑制局部肾素血管紧张素醛固酮系统（RAS）活性和缓激肽的降解来抑制或逆转血管重构[3]。阿齐沙坦是一种血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂，多用于治疗高血压病[4]。但沙坦类药物是否可抑制血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）中MMPs/TIMP的表达则鲜有报道。通过药物抑制MMPs/TIMP活性，减少细胞外基质的降解，阻止血管平滑肌细胞的增殖和迁移是防治高血压发生、发展的一个可能的切入点。本研究观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂阿齐沙坦对血管平滑肌细胞中MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表达的影响，探讨转化生长因子_β（TGF_β）在自发性高血压大鼠发生、发展进程中诱导细胞外MMPs/TIMP分泌及促平滑肌细胞迁移、增殖能力，为临床应用阿齐沙坦治疗高血压提供指导信息。
1资料和方法
1.1材料：自发性高血压大鼠（SHR）和同一株系的正常血压大鼠（WKY）大鼠（购自上海第二医科大学附属瑞金医院高血压研究所），雄性，7～10周龄。血压：SHR>170mmHg（1mmHg=0.113kPa），WKY
1.2实验分组：将大鼠断头处死，无菌情况下分离胸主动脉，剪碎后加入含有20%胎牛血清的DMEM培养液，用贴壁细胞培养法行原代细胞培养至细胞长成致密单层后传代，取3～5代细胞用于实验。在传代过程中，细胞以5×105个/ml接种于6孔板培养板上。实验前48h换成不含血清的DMEM，使细胞处于静止状态。将培养的VSMC分成6组：WKY组、SHR组；TGF_β刺激WKY组、TGF_β刺激SHR组：10ng/ml TGF_β诱导增殖；TGF_β刺激WKY组阿齐沙坦给药组、TGF_β刺激SHR组阿齐沙坦给药组：50μmol/ml阿齐沙坦预处理30min后，用10ng/ml TGF_β诱导增殖。各组均应用0.2%胎血清培养液培养，培养24h后收集细胞。
1.3MTT法检测阿齐沙坦对TGF_β诱导的VSMCs细胞增殖的作用：取对数生长期细胞，以每孔3×104/孔均匀接种于96孔培养板内，按照上述分组方法将各组细胞悬液接种于96孔板上，培养24h后，结束实验，将每孔的培养液吸出，重新加入180μl培养液，然后每孔加入浓度为5mg/ml的MTT液20μl。在37℃培养箱内继续培养4h后，吸取培养液，每孔加入DMSO 200μl振荡10min，用酶联免疫检测仪在490nm波长测定各孔A值，取每组3孔的均值。
1.4Boyden趋化小室检测阿齐沙坦对TGF_β诱导的VSMCs细胞迁移的影响：取对数生长期的VSMCs，将培养的VSMCs分成6组观察VSMCs迁移：WKY组、SHR组：上室中加入未经处理的VSMCs悬液，下室中加人DMEM；TGF_β刺激WKY组、TGF_β刺激SHR组：上室中加入未经处理的VSMCs悬液，下室中加入10ng/ml TGF_β 0.5ml；TGF_β刺激WKY组阿齐沙坦给药组、TGF_β刺激SHR组阿齐沙坦给药组：上室中加入50μmol/ml阿齐沙坦孵育2h的VSMCs悬液，下室中加入10ng/ml TGF_β 0.5ml。上、下室之间隔以8μm孔径聚碳酸酯滤膜。将建立好的Boyden小室放入一容器培养24h后取出滤膜，固定、染色，在高倍镜下（×400）随机观察6个视野，计数移行细胞数，取平均值。
1.5Western blot检测蛋白表达：取对数生长期细胞，0.05%胰蛋白酶消化，PBS洗涤两次后离心弃上清，加入含全酶抑制剂和PMSF的RIPA裂解液冰浴裂解提取总蛋白。BCA法测定样品蛋白浓度，完成十二磺基硫酸钠/聚丙烯酸胺凝胶电泳和蛋白转膜操作，膜片分别与一抗（抗MMP_2多克隆抗体、抗MMP_9多克隆抗体、抗TIMP_1多克隆抗体）进行抗原抗体结合反应，再与辣根酶标记二抗反应，经适当洗涤，膜片与ECL温浴1min，保鲜膜包裹后，经X光片曝光，显影和定影，最后对结果进行光密度扫描分析。
1.6RNA的提取及RT_PCR检测m_RNA表达：以Trizol提取细胞总RNA，按照试剂盒要求操作。MMP_2上游引物序列：5’_GCGACAAGAAGTATGGCTTC_3’，下游引物序列：5’_TGCCAAGGTCAATGTCAGGA_3’；MMP_9上游引物序列：5’_CGCAGACATCGTCATCCAGT_3’，下游引物序列：5’_GGATTGGCCTTGGAAGATGA_3’；TIMP_1上游引物序列：5’_CAATTCCGACCTCGTCATCA_3’，下游引物序列：5’_TCAGAGCCTTGGAGGAGCT_3’，按实验室常规方法进行PCR扩增。用反转录反应液2μl作为模板，加入2μl上游及下游引物和2μl Taq酶后用PCR仪扩增。循环步骤如下：变性94℃ 1min，58℃ 1min和72℃ 1min共35个循环；末次长7min，终止反应。以β_actin为内参，依据2_ΔΔCT法计算各组细胞mRNA的相对表达量。
1.7统计学处理：以SPSS16.0统计分析软件进行统计，计量资料用（x-±s）表达，组间比较采用t检验分析，P
2结果
2.1MTT法检测TGF_β对VSMCs细胞的增殖作用：见图1。MTT法检测结果如图所示：SHR和WKY组VSMCs，TGF_β刺激组细胞增殖水平均显著高于对照组和TGF_β+阿齐沙坦给药组（P0.05）。另外，SHR组VSMCs细胞增殖水平均显著高于相同干预的WKY（#P
图1各组大鼠VSMCs细胞增殖水平的比较
2.2阿齐沙坦对TGF_β诱导的VSMCs细胞迁移的影响：见图2。与WKY组相比，SHR组细胞迁移数目明显增多（#P
图2阿齐沙坦对TGF_β诱导的VSMCs细胞迁移的影响2.3各组VSMCs中MMP_2、MMP_9、TIMP_1蛋白水平比较：Western blot检测结果如图3所示：SHR和WKY组VSMCs，TGF_β刺激组MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表达水平均高于对照组和TGF_β+阿齐沙坦给药组（P0.05）。各组SHR大鼠VSMCs中MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表达水平均显著高于相同干预的WKY大鼠（P
图3MMP_2、MMP_9和TIMP_1在各组细胞中的蛋白的表达
2.4各组VSMCs中MMP_2、MMP_9、TIMP_1 mRNA水平比较：RT_PCR检测结果见图4。SHR和WKY组VSMCs，TGF_β刺激组MMP_2、MMP_9和TIMP_1 mRNA表达水平均高于TGF_β+阿齐沙坦给药组（*P
